临床ELISA测定中可能会出现的问题

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尽管ELISA测定的操作步骤非常简单，但有可能会影响测定结果的因素却较多，分布在测定操作的各步之中，尤以加样、温育和洗板为甚。为帮助大家分析查找测定中出现问题的可能原因，特对常见问题及原因归纳总结于下表。临床ELISA测定中可能会出现的问题及可能的原因问题可能的原因（非试剂盒本身的原因）1．弱阳性质控样本检测不出温育的时间或温度不够；显色反应时间太短；所用配制缓冲液的蒸馏水有问题2．测定的重复性差（相同样本两次测定结果不一致）这是典型的由测定操作引起的问题，包括（1）加样本及试剂量不准；孔间不一致；（2）加样过快，孔间发生污染；（3）加错样本；（4）加样本及试剂时，加在孔壁上部非包被区；（5）不同批号试剂盒中组分混用；（6）温育时间、洗板、显色时间不一致；（7）孔内污染杂物；（8）酶标仪滤光片不正确；（9）血清标本未完全凝固即加入，反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血细胞，易出现假阳性反应等。3．白板（阳性对照不显色）（1）漏加酶结合物；（2）洗板液配制中出现问题，如量筒不干净，含酶YZ物（如叠氮钠）等。（3）漏加显色剂A或B；（4）终止剂当显色剂使用。4．全部板孔均有显色（1）洗板不干净；（2）显色液变质；（3）加底物的吸光受酶污染；（4）洗板液受酶等污染。我公司代理美国知名品牌RDelisa试剂盒，同时在标准品、抗体、血清、生物试剂等方面进行深入研发，国庆新产品已经上市，欢迎电询我公司经理。
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