N-乙酰-DL-丝氨酸说明书,N-乙酰-DL-丝氨酸资料
- 上传人: 上海金穗生物科技有限公司 |大小:19.5KB|浏览:569次|时间:2018-10-08
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[器材和试剂]●PCR试剂和设备。除了用Taq聚合酶缓冲液替代Vent聚合酶缓冲液。各自在适宜缓冲液中保存的Tdg聚合酶,均可使用。●V区特异性正向(3’)(JκFORNot和JλFORNot)和反向(5’)(VHBACKSfiPCR引物●已组装的scFv基因文库●WizardPCR纯化试剂盒(Promega)[方法]1.在0.5ml微量离心管中,配制两个50/z1PCR反应混合液(1个用于VHVκscFv文库,另1个用于VuVλscFv文库),其中含有:●水,36.5//1●10XTag缓冲液,5.0ul●20XdNTP,2.5ul●正向引物,2.0ul●反向引物,2.0ul●scFv基因文库(约long),1.0ul2.在热循环仪格内加热反应管到94℃,5分钟。如果没有加热盖,则滴加1滴轻质矿物油覆盖反应液。3.加入1.0ul(5单位)TdQDNA聚合酶。4.以94℃1分钟、55℃1分钟、72℃1分钟的条件共循环25次,扩增scFv基因。5.用WizardPCR纯化试剂盒,纯化PCR产物。www.shjsbio.com
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