丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒说明书
- 上传人: 上海心语生物科技有限公司 |大小:129.43KB|浏览:1145次|时间:2019-01-02
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丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中丙酮酸激酶(PK)水平。用纯化的丙酮酸激酶(PK)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入丙酮酸激酶(PK),再与HRP标记的丙酮酸激酶(PK)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的丙酮酸激酶(PK)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中丙酮酸激酶(PK)浓度。丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒标本要求:1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。
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