转基因食品检测

相关知识

转基因技术的理论基础来源于进化论衍生来的分子生物学。基因片段的来源可以是提取特定生物体基因组中所需要的目的基因，也可以是人工合成指定序列的DNA片段。DNA片段被转入特定生物中，与其本身的基因组进行重组，再从重组体中进行数代的人工选育，从而获得具有稳定表现特定遗传性状的个体。该技术可以使重组生物增加人们所期望的新性状，培育出新品种。

杂交指基因型不同的个体之间进行的交配。遗传学中经典的也是常用的实验方法。通过不同的基因型的个体之间的交配而取得某些双亲基因重新组合的个体的方法。一般情况下，把通过生殖细胞相互融合而达到这一目的过程称为杂交;杂交就是自然界广泛存在的一种农作物育种方法。

相关政策

2008年国务院通过转基因重大专项之后，国家一度要积极推进转基因研究和商业化进程。

2009年的一号文件中提出“加快推进转基因生物新品种培育科技重大专项，整合科研资源，加大研发力度，尽快培育一批抗虫、抗逆、高产、优质、高效的转基因新品种，并促进产业化”。

2009年底两种转基因水稻获得生物安全证书，转基因主粮的讨论成为2010年两会上的热点，争议大过赞同，于是2010年两会成为中央和国务院对转基因政策态度的分水岭。2011年之后“转基因”的字眼不再出现在中央一号文件中，只有2012年提到“继续实施转基因生物新品种培育科技重大专项”。

今年的一号文件指出“加强农业转基因生物技术研究、安全管理、科学普及”。虽然只有短短几个字，但是党中央和国务院对转基因的态度已经悄然转变。首次提出科学普及，这一点其实在2014年下半年起就已经有趋势，农业部为主的相关部门已经明显加大了转基因正面宣传的力度。

转基因食品的标识

转基因食品的安全性尚无定论。那么，世界各国是怎样标识转基因食品的呢?

中国：不标注不得入境

我国很早就出台关于转基因食品标识标注的相关规定。2001年，国务院颁布《农业转基因生物安全管理条例》，随后农业部又颁布了《农业转基因生物标识管理办法》，当时的卫生部也颁布了《转基因食品卫生管理办法》。

这些行政法规都明确规定，对于农业转基因生物及转基因食品，必须进行明确的提示性标注，例如《转基因食品卫生管理办法》规定，利用基因工程技术改变基因组构成的动物、植物和微生物生产的食品和食品添加剂，标签上必须标注“转基因××食品”或“以转基因××食品为原料”。如果转基因食品来自潜在致敏食物，还得标注“本品转××食物基因，对××食物过敏者注意”字样。

另外，我国还规定，不得销售或进口未标注和不按规定标注的农业转基因生物，其标注应当标明产品中含有转基因成分的主要原料名称。如果进口农业转基因生物不按规定标注，得重新标注后才能入境。

我国转基因食品标识目录，现在主要是5大类、17种产品，包括大豆、玉米、菜籽、棉花种子和番茄。需要指出的是，转基因标识是出于尊重公众知情权，标识与否与安全性无关。

欧盟：成分高于0.9%必须标明

目前，国际上对转基因生物及其产品的标识制度，分为自愿标识和强制性标识两类。采取自愿标识的有美国、加拿大、阿根廷等，其他国家和地区大多采用后者。

欧盟对转基因进行标识管理，主要分食品和饲料两部分。1990年，欧盟颁布转基因生物管理法规，确立转基因食品标识管理框架。后来要求对所有转基因植物衍生的食品及饲料进行标识，目前将限量降低到0.9%，即当食品或饲料中某一成分的转基因含量达到0.9%时，必须清楚明“本产品包含转基因生物”或“由转基因(生物)制成”。

需注意的是，在欧盟国家，一些混合成分的食品或饲料，所含转基因成分比例低于0.9%，并且转基因生物的出现是偶然或技术上不可避免的因素造成的，就可不用标识。此外，由转基因饲料喂养的动物产品，如肉类、蛋类和奶类不需要标识。

俄罗斯：一律要求标注转基因

从2004年6月1日起至今，俄罗斯政府规定，转基因成分超过0.9%的食品都需要做标注，同欧盟的标准一致。

据《俄罗斯之声》电台今年3月27日报道,普京总统表示,俄罗斯拥有充足的机制,可在不违反世贸组织规定的义务下,保护市场和国民免受转基因食品侵害。俄总理梅德韦杰夫曾下令对俄境内是否种植转基因作物进行调查，并要求有关部门整理出所有转基因产品的进口数据，以作为将来立法的基础。俄消费者权益和人类福利保护联邦服务机构此前提出一项草案，希望对生产和销售含有转基因成分食品，却未按规定在食品标签注明的厂家和商家，施以罚款。

美国：实行自愿标识制度

美国一直都对转基因食品实行自愿标识制度。自愿标识是指法律并未规定必须对转基因食品进行标识，对于实质等同于同类传统食品的转基因食品，美国食品药品管理局坚持实行自愿标识制度。但如果转基因食品中含有致敏性成分，或者食品成分与安全性有关，就必须明确标注出来，以便消费者做出选择。

日本：强制和自愿相结合

日本则采用强制标识和自愿标识相结合的方式。2001年日本规定，已经通过安全性认证的大豆、玉米、马铃薯、油菜籽、棉籽5种转基因农产品，及以这些农产品为主要原料、加工后仍然残留重组DNA或由其编码的蛋白质食品，如果在食品原料构成比例中占前三位、重量占食品总重量的5%以上，就必须标识“含转基因”等相关字样。

在日本，食品上标注“不含转基因”是一种自愿性标识，必须同时满足以下两个条件：转基因成分不超过5%;证明该种食品在生产和销售的每一阶段都有周密的区别性管理。

澳大利亚：三种情形须标注

一是该基因改造食物成分，与同种的非转基因产品有很大差异。例如，转基因技术提高了产品的维生素含量，必须加贴标签。二是转基因产品本身自然发生的毒性，与同种非转基因产品有显著差异。三是使用转基因技术生产的食物，含有“新成分”可能会导致部分人发生过敏反应的。

但是，澳大利亚有些情形可豁免标注。如产品中已经不含改造的DNA或蛋白质的精炼食品，从转基因玉米中提炼的食用油属于这种;再如，使用含转基因成分的加工助剂或食品添加剂，但产品中不含新的DNA的食品;还有在销售点配制的食物，如餐馆。

检测方法

目前对转基因食品的检测按原理主要分为针对外源蛋白质和针对外源DNA两种鉴定技术。

外源蛋白质的测定

即从蛋白质水平对转基因食品进行检测，实际应用中主要采用的是免疫学检测法，即Western杂交、酶联免疫吸附法(ELISA)和试纸条法。免疫学检测法可以检测具有抗原性的蛋白质类表达产物的存在，它是通过抗原抗体特异反应来实现的。

外源DNA的检测

目前对于外源基因的检测主要是通过对转入的外源基因进行PCR扩增，然后进行紫外或荧光检测。PCR技术全称“聚合酶链反应技术”，是一种在体外由引物引导的DNA聚合酶催化的聚合反应，能在短时间内准确地将目的序列大量复制。在转基因食品检测方面，主要是用于从DNA即基因水平来鉴定被测食品。由于它的快速、灵敏、费用低、检测仅需微量的DNA并且可以同时检测多个样品，正成为这一领域日趋成熟的方法之一。

定性PCR 转基因食品重组DNA的基本机构包括启动子、目的基因、终止子和标记基因。由于目的基因种类繁多，所以先用转基因食品Z常用的转录启动子CaMV35S、转录终止子NOS及抗生素抗体基因NPTII三个序列来设计引物进行PCR反应，对结果阳性者可再检测目的基因。

定量PCR PCR反应具有高度特异性和敏感性，但对实验技术的要求很高，其结果易受许多因素的干扰而产生误差，一般PCR只用作转基因食品的定性筛选检测。针对所存在的问题，研究人员在实验设计中引入内部参照反应，以消除检测时的干扰，并与已知含量的序列GMO标准样的PCR结果进行比较，从而可以半定量地检测待测样品的GMO含量。

近年来定量竞争PCR和实时荧光定量PCR都已用于转基因食品的定量检测。竞争性定量的基本原理是用人工设计的竞争模板以不同稀释度与标本共同扩增，以竞争模板的稀释度和结果做标准曲线，判断标本中待测核酸的量。

实时荧光PCR技术是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时检测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量的方法。这种检测方法采用独特全封闭反应，只须在加样时打开一次盖子，减少了污染，具有高度的灵敏性。

PCR-ELISA 这是一种将PCR的高效性与ELISA高特异性结合在一起的检测方法，它利用地高辛或生物素等标记引物，将PCR扩增产物与固相板上特异的探针结合，再加入抗地高辛或生物素的酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物，使底物显色，在酶标仪上读取数值。利用PCR-ELISA法对转基因大豆检测，灵敏度比欧盟推荐的PCR方法高5-10倍。它快速方便，避免了有毒物质EB的使用，适合大批量自动检测。