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牛奶中抗生素检测

05-06 15:24:31  来源:内容来源于网络
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【导读】抗生素作为一种能抑制和杀灭细菌的药物,已被广泛用于医疗卫生、畜禽养殖、农业生产等行业,为社会的经济发展做出了很大的贡献。

 

牛奶中抗生素的种类

 

β-内酰胺类 属于此类的抗生素的有青霉素类和头孢霉素类,常用于奶牛等家畜的个体临床治疗,残留在牛乳中。

 

四环素类 常见种类有四环素、金霉素、土霉素、强力霉素等,是一类广谱抗生素。

 

氨基糖苷类 常见种类有庆大霉素、链霉素、二氢链霉素、新霉素、壮观霉素等,是常用于家畜的氨基糖苷类抗生素。

 

氯霉素类 包括以下三种化合物:氯霉素,甲砜霉素,氟甲砜霉素。这类药物都是严格限制使用的兽药,有些国家禁止使用。

 

大环内酯类 常见种类有红霉素、秦乐霉素、林可霉素、螺旋霉素和盐霉素等。

 

磺胺类 常见种类有磺胺二甲嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺甲嘧啶、磺胺嘧啶等,甲氧苄啶是磺胺增效剂,不单独使用。

 

抗生素残留的来源

 

治疗泌乳期病牛时使用的抗生素

 

  主要是对乳腺炎等常见疾病治疗时使用抗生素造成的。奶牛乳房炎、隐性乳房炎、奶牛子宫内膜炎和蹄病是奶牛的常见病,通常对奶牛这些疾病的治疗常采用青霉素、链霉素、庆大霉素、氯霉素、新霉素等抗生素。

 

奶牛饲料添加剂中使用的抗生素

 

  抗生素对畜禽的生产有促进作用,杀灭或抑制畜体内(特别是消化道内)的有害微生物,调节畜体胃肠道微生态平衡,从而改善动物健康,促进动物生长,达到预防奶牛疾病和促进其生产力提高的目的。但饲料中添加抗生素就很容易在牛奶中造成残留。这也是造成牛奶中抗生素残留的一个非常重要的一个原因。

 

抗生素污染的挤奶和贮藏奶的器具

 

  有些奶场与牛奶直接接触的器具使用非常混乱,对患有乳房炎的病牛用过的挤奶器具,没有先进行严格的清洗与消毒,就直接用于健康牛只的挤奶。这样,前者奶中残留的抗生素就会对后者的奶造成抗生素污染。

 

人为地在牛奶中添加抗生素

 

  有些牛场和奶牛养殖户,由于不具备贮藏牛奶的技术和能力,为了防止奶中细菌的增加和奶的酸败,通常向牛奶中加入一些诸如抗生素之类的药物,这也是牛奶中抗生素来源的原因之一。

 

抗生素残留的危害

 

危害人体健康

 

   直接毒性长期摄入抗生素残留超标的牛奶可造成蓄积性中毒;如长期摄入氨基糖苷类可导致肾毒性和耳毒性。

 

   过敏反应:许多抗生素如青霉素、头孢菌素、四环素、磺胺类等均具有抗原性,可引起人的过敏反应。

 

  “三致”作用:有少数抗生素具有致畸、致突变、致癌作用,如果长期饮用残留有“三致”作用的抗生素的牛奶,将对人的健康产生严重的危害,特别对幼儿和胎儿的影响巨大,最终可能产生致癌、致突变、致畸作用。

 

   破坏人体胃肠道的菌群平衡:如果长期摄入含抗奶,体内敏感菌群将被杀灭或抑制,而耐药菌群却大量繁殖,从而打破原来的平衡状态,导致长期腹泻或营养不良,严重时还可造成耐药菌感染。

 

   造成人体病原菌耐药性增加:对于经常饮用含抗奶的人而言,等于长期吸收低剂量的抗生素,一方面可引起体内部分病原菌对多种抗生素逐渐产生耐药性;另一方面,在奶牛养殖场中使用抗生素可以选择耐药性细菌,耐药性细菌可能通过食品进入人体,然后将耐药因子转移给人体内的敏感菌。

 

   影响人体的免疫功能:有些抗生素能抑制免疫活性细胞的生长,或使其易于破坏,如氨苄青霉素、氯霉素、磺胺类等能抑制骨髓白细胞生成,导致白细胞减少。

 

危害生态平衡

 

  一些性质稳定的抗生素随废弃的含抗奶进入到环境中后仍能稳定存在很长时间,也会对生态环境中的微生物产生影响,如破坏土壤和水中微生物平衡,增加环境中的耐药菌株,对生活在这一环境中的人类及其他生物构成极大的威胁。

 

危害奶制品加工

 

  原料奶中残留的抗生素将抑制发酵乳、发酵菌种的繁殖,导致牛乳的发酵不能正常完成或出现异常发酵,从而严重影响干酪、黄油、酸乳的发酵和后期风味的形成,使奶制品品质、产量和口感降低,给乳品生产企业造成巨大的经济损失。

 

危害奶制品的国际贸易

 

  抗生素残留正在成为国际食品贸易中最容易引发贸易冲突的敏感问题,由于抗生素残留超标已经给我国的动物性食品带来很大的政治和经济损失,抗生素残留已经成为国际贸易的绿色壁垒。

 

 

抗生素残留的检测方法

 

传统的微生物检测法

 

  微生物检测法出现较早,从出现至今,大大改善了我国抗生素检测手段的发展,其测定原理是基于抗生素对微生物的生理机能、代谢具有一定的抑制效果,与临床应用保持一致,相对而言,其耗费的时间久,且存在着较大的误差,目前最常应用的是TTC法、戴尔沃检测(Delvotest SP)法、BY法等。

 

   ·国际通用的检测法

 

  相对而言,其是国际上应用较早的通用测定方法,也是我国制定的监测方法,其原理是:如果牛奶中含有抗生素,则加入菌种(嗜热链球菌)经培育2.5-3h后,加入TTC指示剂(三苯基四氮唑)不发生还原反应,所以样品呈无色状态。如果牛奶中不含抗生素,则样品呈红色。相对而言,这一方法费用较低,但是耗时,因此应用不算太广,发展受到一定的限制。

 

   ·戴尔沃检测法

 

  该方法出现在荷兰,其原理主要是利用一种微生物叫嗜热芽胞菌,其在64℃条件下培养2.5~3h后会产酸,酸引起指示剂BCP(溴甲酚紫)变为黄色;若牛奶样品中不含抗生素,培养后样品呈黄色,如样品中含有抗生素,嗜热芽胞菌生长受到抑制而无法产酸,指示剂将不变色。这一方法操作简单,实用,容易判断,结果可靠,相对费用较低,但是其结果偶尔会出现假阳性,此方法适用于农场、企业、实验室及政府监测部门。

 

   ·蓝黄检测法

 

  该方法是一种广谱的微生物抑制法,相对而言,耗时短,可以在短时间内检查出抗生素的残留情况,只要通过颜色对比既可以得出结论,通过这一检测方法得到的检测结果存在着一定的误差,容易造成误检,但是耗时短,费用低。

 

现代仪器分析法

 

  这一方法主要是借助现代仪器进行检测,测定其残留的抗生素种类,最常用的是色谱法、荧光法、毛细管电泳、色谱质谱联用技术等。运用不同的理论,采用不同的手段进行检测,提高检测的标准,加强检测的质量。相对而言,该方法分离速度快,高效,实现自动化控制,可以检测出抗生素的具体含量,其结果更加准确,但待检样品需经一系列的预处理,繁琐费时,还必须有相应的价格昂贵的仪器设备。一般在大型实验室使用,适合于精确测定。

 

生化免疫法

 

  这是近年来随着新科技的发展而逐渐发展起来的,其是以抗原与抗体的特异性与可逆性进行结合,是一种分析就技术。基本原理家就是抗原体的竞争性结合,可分为酶联免疫测定法(ELISA)、荧光免疫测定法(FIA)、免疫分析技术与常规理化分析技术联用的方法等。几种方法各有优缺点,必须注重其综合使用,提高检测的质量与准确度。从其实践的结果来看,其对抗生素的残留现状检测效果良好,灵敏度极高,达到ng级水平;检测快速、专一性强。相对而言,此法具有高度的专一性,每检测一种抗生素就要制备或购买相应的抗原或抗体,导致检测费用较高。因此生化免疫检测法不可能取代色谱或光谱等常规分析方法,只能作为其重要的补充。

 

专一试剂盒法

 

  所谓的专一试剂盒法就是根据含有芽孢杆菌的琼脂培养基和PH指示剂在一定的温度下进行培养,一般维持在65℃左右,孢子发育生长,降低培养基pH值,在pH指示剂的作用下,蓝(紫)色变为绿-黄色。生鲜牛乳中的抗生素残留使微生物生长和酸的产生受到抑制,由于没有酸生成,颜色将不会改变。目前在市场中普遍应用的试剂盒有两种,ECLIPSE50和ECLIPSE100两种试剂盒。相对而言,ECLIPSE100的精度高,但是ECLIPSE50的检测标准与方法以及检测结果都更加接近国际的水平,其操作简单方便,更具灵活性,无需做处理样品的工作,降低工作的难度,检测效果质量高,费用较低,因此目前其普及度较高。

 

 


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