Biotin标签蛋白检测工具:快速检测生物素化蛋白质

Biotin标签蛋白检测工具

亲合素主要包括卵白亲合素（Avidin，A）、链霉亲合素（Streptavidin，SA）、卵黄亲合素及类亲合素等。后两种因其特异性亲合力低，研究不多，前两种目前已深入研究并得到广泛应用。其中链霉亲合素（SA）是与亲合素（A）有类似生物学特性的一种蛋白质。是由Streptomyces avidin菌在培养过程中分泌的一种蛋白质产物，SA也可通过基因工程手段生产。SA分子量为65000，由4条序列相同的肽链构成，每条SA肽链可以结合1个生物素分子。近年大量研究证实，生物素—亲合素系统几乎可与目前研究成功的各种标记物结合。在生物素-亲和素系统中，借助所形成的亲和素-生物素-酶复合物，追踪生物素标记的抗原或抗体，通过酶催化底物显色，可检出相应的抗体或抗原。

使用HRP直标链霉亲和素产品，快速、特异性检测生物素化蛋白质

链霉亲和素， HRP辣根过氧化物酶标记

辣根过氧化物酶标记链霉亲和素（SA-HRP）由链霉亲和素（Streptavidin, SA）和辣根过氧化物酶（Horseradish Peroxidase）交联所得，可用于生物素化的抗体、蛋白、组织、细胞、核酸等样品的检测，常作为信号放大器，提高检测灵敏度。

链霉亲和素（SA）为4个相同亚基形成的四聚体蛋白质，分子量约为60 kDa，可以高度特异性地与生物素（Biotin）结合，1个SA可以结合4个生物素。与鸡蛋清来源的亲和素（Avidin）相比，SA无糖基化、等电点为中性或略酸性，因此SA的非特异性结合比Avidin低很多，用于检测时非特异性背景就很低。

辣根过氧化物酶（HRP）是一种含亚铁血红素的糖蛋白，分子量约为40 kDa，糖含量18%，显棕色。能与底物孵育，产生一种着色、荧光或发光标记的分子衍生物，这种现象使之广泛应用于分子生物学、生物化学、免疫学等领域的检测。

下表为常规用途的推荐稀释比例，实际试验操作过程中可根据具体实验情况适当调整HRP-SA的稀释比例。以常规的Western bolt为例，每次检测需要10 ml 1:2000的稀释液，每次只需5 μl(5 μg)。