仪器网首页 欢迎您: 请登录 免费注册 仪器双拼网址:www.yiqi.com
发求购 学知识 提问题 查标准 找商机 手机版
官方微信
山东博科生物产业有限公司
主营产品:安全防护设备 消毒灭菌设备 低温冷链设备 实验培养设备
产品文章
 
当前位置:首页>产品文章>ELISA实验那些你忽略的雷区

ELISA实验那些你忽略的雷区

发布:山东博科生物产业有限公司
浏览次数:884

酶联免疫吸附剂测定法,简称酶联免疫法,或者ELISA法。具体的操作步骤大致分为加样本、温育、洗板、加酶标物、温育、洗板、加显色剂、温育、加终止液、比色读数。当然具体的检验步骤还是严格按照试剂说明书来操作。每一个小步骤出了问题都可能影响整个实验的准确性。所以我们应该注意每一个细节。细节决定成败。下面咱们就来细说一下ELISA实验中需要注意的问题。

一、标本

1、避免溶血;

2、尽量新鲜,避免细菌污染(一般5天内测量的血清可在4℃条件下保存,否则低温保存)。

二、试剂

1、使用前平衡至室温;

2、配置洗板液应该使用去离子水或者蒸馏水,保证水的新鲜。

三、设计实验

1、设计好孔位,通常阴阳对照2个孔,空白对照1孔(必要时做好标注,避免错误)。

四、加样

1、样品应全部加于反应孔底部,避免液体悬挂在孔壁上,并注意不可溅出,不可产生气泡;

2、加样量准确;

3、手工操作时加一下样本时要及时更换吸嘴。

image.png

五、温育

1、温度、时间要严格控制;

2、**使反应杯尽快升高到所需温度;

3、温育常采用的温度有43℃、37℃、室温等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。

六、洗板

1、使用专用洗涤液,一般洗涤4-6次;

2、若手工洗涤,前两次洗涤都不溢出反应孔,防止污染,后面几次洗涤都应加满反应孔,这样洗涤更干净;

3、每次加洗涤液后应浸泡30秒,再甩去洗液;

4、反应板倒扣吸水纸上拍干。

七、显色与比色

1、空白孔校零,读取各孔OD值;

2、单波长or双波长选择:

a、单波长通常对显色具有Zda吸收的450nm或492nm;

b、双波长则是在敏感波长450nm和非敏感波长630nm下各测一次。使用双波长时不用设置空白孔,否则会造成孔吸光度为负数。

image.png


了解并有效地避开以上提到的实验雷区,可以大大提高实验的准确性,相信只要用心思考你就会成为Z专业的检验师,博科酶免为您提供Z周到细致的服务,为了人类的美好明天,我们一直在努力!

image.png

2019-03-08
相关仪器
认证会员 第 7 年

山东博科生物产业有限公司

认证:工商信息已核实
仪企号 
山东博科生物产业有限公司
友情链接 
手机版 
山东博科生物产业有限公司手机站
开启全新的世界
m.yiqi.com/zt5094/
官方微信

仪器网微信服务号

扫码获取最新信息


仪器网官方订阅号

扫码获取最新信息

在线客服

咨询客服

在线客服
工作日:  9:00-18:00
联系客服 企业专属客服
电话客服:  400-822-6768
工作日:  9:00-18:00
订阅商机

仪采招微信公众号

采购信息一键获取海量商机轻松掌控