经光辐照后防晒霜的原位HPTLC-费氏弧菌生物活性分析

内容节点: 概述; 实验/设备条件; 样品提取; 实验/操作方法; 实验结果/结论; 仪器/耗材清单

防晒油是为了保护人体皮肤免受UVA（波长320～400 nm）和UVB（波长275～320 nm）的辐射损害然而早在1997年的研究结果[1]即显示，一些产品配方中所添加的UV防晒剂当暴露于阳光中会发生成分降解，存在潜在危害但有关这些降解产物的毒理学相关研究迄今未见报导本文所介绍的方法结合了色谱分离与生物活性检测技术，能够确定防晒霜产品中光降解产物的具有专属性的生物活性 HPTLC-生物自发光联用技术系将物理及化学的分离技术与采用发光细菌费氏弧菌（Vibrio fischeri）的生物检测方法将融合的专属性分析技术生物发光YZ剂可对细菌的新陈代谢造成干扰，其YZ活性的等级与其化合物毒性呈正相关Vibrio fischeri细菌自1979年起就用于生态毒理学分析，特别是水样测试（德国国标DIN 38412 L34 比色法）以及化学品测试为了将细菌作为一种HPTLCGX薄层色谱的衍生化显色手段，需要借助Bioluminex特种试剂盒（www.chromadex.com） 瑞士巴赛尔一史达特州立实验室是该州对于食品玩具和化妆品等各类生活用品质量进行法规监管的权力机构作为非食品部门主任的Dr. Christopher Hohl，着力于分析日用消费品中的各种添加物，如保鲜剂染料色素和紫外防晒剂（UV filters）等其工作还包括针对各类有害的目标化合物开发适合的GC，HPLC以及HPTLC分析方法Z近引进的基于HPTLC-生物自发光技术的毒理学检测技术帮助该部门在筛查未知化合物时发现了数个感兴趣的具有特殊毒性的色谱成分 与传统的检测手段相比，生物检测显示了与众不同的结果：一些在色谱中具有高UV响应值的成分斑点并未观察到生物发光的改变，而另一些斑点在生物自显影图谱中则得到了很强的表达，另外也有一些成分在2种图谱中拥有基本一致的信号强度非常有趣的一点是，UV防晒剂的生物活性强度与其分子量具有负相关性在1998年后推出的所有新的UV防晒剂类型（分子量均大于400），对Vibrio fischeri基本显示YZ效应 为了比较HPTLC和HPLC方法以及鉴别降解产物，防晒霜提取物在HPTLC薄层板上展开后，将感兴趣的活性成分斑点从板上刮下并采用HPLC-DAD和LC-MS进行分析该鉴别流程结果满意，由于HPTLC的塔板个数低于HPLC，因此薄层板上的某些个活性斑点在HPLC系统中被分开为几个色谱峰生物发光检测下成分的峰高与传统检测方式（HPTLC-UV，HPLC-DAD和LC-MS）下的响应不呈线性关系甚至有一个高活性成分采用各种物理-化学方法都无法得到检测 Vibrio fischeri生物活性检测可用于2个目的：一是它独特的选择性检测机制使其可以探测到过去无法发现的化合物第二，细菌YZ作用作为一种活性指标可以帮助甄别出哪些光降解产物需要进行更进一步的毒理学评估生物发光检测仪