反相GX液相色谱法测定乳制品中核苷酸方法的研究

色谱柱：Diamonsil C18 200×4.6 mm, 5μm (Cat#:99902)

流动相：①0.01mol/L K₂HPO₄ 960mL + 0.1mol/L K₂HPO₄ 40mL pH=5 ②乙腈: (0.01mol/L KH₂PO₄ + 0.005mol/L K₂HPO₄ + 1mmol/L 四丁基溴化氨,磷酸调pH5.0) = 5 :95

流速:1.0mL/min

柱温:25 ℃

检测器：紫外检测器,254nm

摘要：建立了GX液相色谱法测定乳制品中核苷酸含量的方法.采用紫外检测器 ,波长为 2 5 4nm ;色谱柱为迪马钻石C18,柱温为 2 5℃ ,流动相为① 0 0 1mol/LK2 HPO496 0ml+0 1mol/LK2 HPO440mlpH5 ;测定腺嘌呤核苷 (AMP)、鸟嘌呤核苷 (GMP)、次黄嘌呤核苷 (IMP).②乙腈 :(0 0 1mol/LKH2 PO4+0 0 0 5mol/LK2 HPO4+1mmol/L四丁基溴化氨 ,磷酸调 pH5 0 ) =5 :95 ,测定胞嘧啶核苷 (CMP)、脲嘧啶核苷 (CMP).流速为 1 0ml/min五种核苷酸组分.标准曲线相关系数r为CMP 0 986 8;UMP 0 9879;GMP 0 9792 ;IMP 0 9799;AMP0 95 5 3;回收率为 94 6 % ;8次样品重复测定变异系数为 1 79%.

         图1 　流动相(3) 分离五种核苷酸的效果

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