鱼肉中妥布霉素的测定 SPE-UPLC-MS/MS法-ProElut PXC+Platisil CN

内容节点: 概述; 实验/设备条件; 样品提取; 实验/操作方法; 实验结果/结论; 仪器/耗材清单

方法：

SPE-UPLC-MS/MS法

基质：

鱼肉

应用编号：

102404

化合物：

妥布霉素

固定相：

——

SPE柱：

ProElut PXC 60mg / 3mL 50/pk

色谱柱：

Platisil CN 5μm 150 x 4.6mm

样品前处理：

1.标准品配制

(1)单标储备液1000 ug/mL，准确称取妥布霉素，用水配制成1000 ug/mL的储备液。

(2)中间液10.0 ug/mL，吸取适量单标储备液1000 ug/mL，用水配制成10 ug/mL的中间液。

2.提取

(1) 称取样品（鱼肉）5.0g（极ng确至0.05g），置于50mL离心管中。加入20 mL三水（25 g/L）和2 mL二氯甲烷，涡旋分散，振荡5 min，8000 r/min离心2min，收集上清液；

(2) 在上清液中加入5mL乙腈混匀，8000 r/min离心2min，待净化（离心为了去除乙腈水溶解时产生的气泡）。

3.净化

ProElut PXC 60mg/3mL（Cat.#68203）

(1)活    化：

依次加入3mL甲醇，3 mL水，流出液弃去；

(2)上    样：

将上样液加入柱中，流出液弃去；

(3)淋    洗：

(4)洗    脱：

依次用5mL水、3 mL甲醇淋洗，流出液弃去；

3 mL20%氨水甲醇洗脱，收集洗脱液；

(5)定    容：

将洗脱液在40℃水浴下通入氮气吹至0.2mL，然后用流动相重新定容至0.5 mL，上机分析。

同方法制备基质匹配标准溶液。

色谱条件：

UPLC 条件：

色谱柱：Platisil CN，150×4.6 mm，5 μm (Cat#：99506)

流速：0.5 mL/min    进样量：5 μL   柱温：35 ℃

流动相： A：3%甲酸水   B：3%甲酸乙腈    A：B=9:1

质谱条件：

电离模式：ESI            扫描方式：正离子扫描

检测方式：多反应监测     电喷雾电压：5500 V

雾化气压力：60 psi        辅助气压力：60 psi

气帘气压力：25 psi        离子源温度：550 ℃

文章出处：

天津应用实验室

关键字：

鱼肉、妥布霉素、SPE-UPLC-MS/MS法、ProElut PXC、Platisil CN

摘要：

目前有关妥布霉素检测的文献和标准较少，主要参考标准《GB/T 21323-2007 动物组织中氨基糖苷类药物残留量的测定 GX液相色谱-质谱质谱法》；GX液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)具有高灵敏度和高特异性，适用于基质复杂、样品组分含量很低的兽药残留的确证分析。

迪马科技开发的《鱼肉中妥布霉素的检测》，采用三水提取、ProElut PXC固相萃取柱净化和超GX液相色谱-质谱法检测。本方案具有：前处理步骤简单、回收率高、方法稳定性好、净化效果优异等特点；定量限是20 μg /kg，与国标方法一致；用氰基柱进行分析，峰形和保留时间符合要求；过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，检测成本相对较低；

图谱：

(1)活化：	依次加入3mL甲醇，3 mL水，流出液弃去；
(2)上样：	将上样液加入柱中，流出液弃去；
(3)淋洗： (4)洗脱：	依次用5mL水、3 mL甲醇淋洗，流出液弃去； 3 mL20%氨水甲醇洗脱，收集洗脱液；
(5)定容：	将洗脱液在40℃水浴下通入氮气吹至0.2mL，然后用流动相重新定容至0.5 mL，上机分析。