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水产品中孔雀石绿和无色孔雀石绿的测定

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内容节点
概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单



方法:

SPE/HPLC



基质:

畜肉及水产品



应用编号:

101306



化合物:

孔雀石绿;无色孔雀石绿




SPE柱:


ProElut AL-N 1000mg / 6mL 30/pk
ProElut SCX 500mg / 3mL 50/pk



色谱柱:


Diamonsil C18(2) 5μm 250 x 4.6mm




样品前处理:


1、提取



10 g 样品与3 mL 盐酸羟胺溶液(0.25 g/mL)、5 mL 对甲苯磺酸溶液(0.05 mol/L)和20 mL 乙酸铵溶液(0.1 mol/L)以及60 mL 乙腈混合,10000 rpm 下均质2 min ;



将混合物在4000 rpm 下离心5 min,上清液转入分液漏斗,30 mL 乙腈重复提取残渣,上清液并入分液漏斗。



向分液漏斗加入50 mL 水、2 mL 二甘醇和25 mL 二氯甲烷,振荡,静置分层,收集下层液体。再加入25 mL 二氯甲烷重复萃取一次,合并萃取液。



将萃取液在25 oC 下减压蒸馏至近干,瓶中残渣待净化。



 



2、净化



a 活化: 将ProElut SCX 500 mg/3 mL (Cat.#63604) 安装在固相萃取装置上,上端连接ProElut Al-N 1 g/6 mL (Cat.#65306),用5 mL 乙腈活化小柱,流出液弃去;



b 上样: 6 mL 乙腈分三次洗涤蒸馏瓶,洗涤液过柱,流出液弃去;



c 淋洗: 用5 mL 乙腈淋洗小柱后,弃去中性氧化铝柱,然后将SCX 柱抽干;



d 洗脱: 5 mL 乙酸乙酯+ 甲醇+ 氨水混合溶液(体积比为50/45/5)洗脱,收集洗脱液;



e 重新溶解:30 oC 下减压蒸馏至干,用1 mL 流动相定容,微孔滤膜过滤后,HPLC 分析




色谱条件:


柱后氧化柱:35 x 4.6 mm



流动相:乙腈/ 乙酸铵溶液 (0.125 mol/L,pH 4.5) =80/20



流速:1 mL/min



进样量:20 μL



柱温:35 oC



检测器:UV 618 nm




文章出处:

P089



关键字:

孔雀石绿,无色孔雀石绿,水产品,Diamonsil C18(2),钻石二代,ProElut SCX



摘要:


适用于鱼、虾、蟹、甲鱼等水产品中孔雀石绿和无色孔雀石绿的检测。




图谱:






1. 孔雀石绿;2. 无色孔雀石绿



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