样品准备
(1) 取2 g样品,加入0.4 g α-淀粉酶和10 mL水,充分混匀,60℃水浴30 min;
(2) 加入15 mLVc*和5 mL 氢氧化钾水溶液*,充分混匀,53℃水浴30 min,间隔振摇,离心取上清液,用水定容至50 mL,待净化。
*VC:维生素C的乙醇溶液(15 g/L)。 *氢氧化钾水溶液:称取固体氢氧化钾250 g,加入200 mL水溶解。
SPE柱净化——ProElut PLS 150 mg/6 mL (Cat.#:68004)
(1)活 化:依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水,弃去流出液;
(2)上 样:再将待净化液加入柱中,弃去流出液;
(3)淋 洗:向柱中加入5 mL 30%乙醇水溶液,弃去流出液,抽干;
(4)洗 脱:向柱中加入30 mL 甲醇,收集流出液;
(5)重新溶解:将洗脱液在40 ℃减压蒸至近干,用甲醇定容至1 mL,供HPLC分析。
分析条件 色谱柱:Spursil C18-EP,250 mm×4.6 mm,5μm(Cat# 82106) 流 速:1.0mL/min 检测器:VA:UV 325 nm,VD2、VD3:UV 264 nm,VE:UV 294 nm 柱 温:30℃ 进样量:20 μL 流动相: A:水,B:甲醇
天津市拓普仪器有限公司原天津市光学仪器厂,是国家定点生产制造物理分光仪器的ZD企业公司现位于天津市南开区高新
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