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HPLC测定叶酸-青霉素G酰化酶对N-苯乙酰化阿霉素的催化活性

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内容节点
概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单



方法:

HPLC



基质:

药品



应用编号:

102739



化合物:

青霉素G酰化酶, N-苯乙酰化阿霉素





色谱柱:


Diamonsil C18 5μm 250 x 4.6mm





色谱条件:


色谱柱:Diamonsil C18 250 mm× 4.6 mm, 5μm(Cat#:99903)



流动相: 乙腈-水, 85%磷酸调节pH为2.4 梯度程序: 0~ 3 min 为24%乙腈, 3~15 min 为80%乙腈



流速: 1.0 mL/min



进样量: 10 μL



检测器: UV 495 nm




文章出处:

ZG药科大学学报 2005,36(6):535-537



关键字:

叶酸, 青霉素G酰化酶, N-苯乙酰化阿霉素, 催化活性, Diamonsil C18, 钻石一代, GX液相色谱法, HPLC




图谱:


 









摘要:目的:利用GX液相色谱法测定叶酸-青霉素G酰化酶(PGA)对N-苯乙酰化阿霉素(DOXP)的催化活性,为叶酸导向的酶催化前体药物的肿瘤ZL(FDEPT)研究奠定理论基础。方法:色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水,用85%磷酸调节pH至2.4;梯度程序:0~3 min为24%乙腈,3~15min为80%乙腈;紫外检测波长:495 nm;流速:1 mL/min。结果:DOXP和酶解产物阿霉素的tR分别为5.5 min和12.3 min,原酶PGA和叶酸-PGA偶联酶对DOXP的Km和vmax分别为15μmol/mL,0.094μmol/(min.mg)和19μmol/mL,0.086μmol/(min.mg)。结论:DOXP为PGA的较好底物,叶酸与PGA偶联对酶的催化活性的影响较小。











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