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枯草芽孢杆菌JA 产生的脂肽类抗生素−iturin A 的纯化及电喷雾质谱鉴定

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内容节点
概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单



方法:

HPLC



基质:

土壤



应用编号:

102195



化合物:

枯草芽孢杆菌,脂肽类抗生素





色谱柱:


Diamonsil C18(2) 5μm 250 x 4.6mm





色谱条件:


色谱柱:Diamonsil C18(2) 250×4.6 mm, 5μm (Cat#:99603)



流动相:A为含0.1%TFA 的乙腈,B为含0.1%TFA的超纯水;历经梯度洗脱的过程是25 min 内A:B由 30:70~55:45



流速:1.0mL/min



检测器:紫外检测器,214nm




文章出处:

微生物学报Acta Microbiologica Sinica 2008,1(48):116-120



关键字:

枯草芽孢杆菌,脂肽类抗生素,分离纯化,电喷雾质谱(ESI/MS),碰撞诱导解离(CID),iturin A,Diamonsil C18(2),钻石二代




图谱:


摘要:枯草芽孢杆菌JA产生的抗生素对植物病原真菌具有广谱抗性,明确抗生素的种类是进一步研究的基础.用6mol/L盐酸沉淀JA菌株的去菌体培养基,再用甲醇抽提获得抗生素的粗提物.利用反相HPLC系统,将粗提物过Diamonsil C18柱,收集有抗小麦赤霉病等病原真菌活性的化合物1、2.运用电喷雾质谱法(ESI/MS)测得其分子量分别为1042.4D和1056.5D.再利用碰撞诱导解离(CID)技术获得化合物的典型结构特征离子碎片,结果表明分子量为1042.4D的化合物一级结构为Pro-Asn-Tyr-βAA-Asn-Tyr-Asn-Gln(βAA为14个碳原子的氨基脂肪酸),属于脂iturin A.化合物1、2为相差一个亚甲基(-CH2)的iturinA同系物.研究结果提供了一种从枯草芽孢杆菌发酵液中快速分离纯化和鉴定脂肽类抗生素iturin A的新方法.





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