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P4SPR表面等离子分析仪用于蛋白质-核酸相互作用的检测

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【概述】

DNARNAPNA等核酸可以采用与蛋白质活性位点结合的活性结构。与蛋白质-抗体结合类似, 蛋白质-核酸 (NA) 结合表现出各种亲和力,这可以通过改变NA的序列来调节蛋白质-NA对的亲和力。这种设计NA序列以与靶蛋白达到特定亲和力范围的筛选策略被用于新兴的应用,例如个性化医疗。SPR(Surface Plasmon Resonance)是一种功能强大的无标记技术,可以提供蛋白质-NA结合动力学数据,以便支持学术和临床研究,从而理解和调节核心细胞过程,如转录调控。

【实验/设备条件】

(1)Affinite的肽SPR芯片

(2)硫醇化寡核苷酸

(3)PBS 1 × pH 7.4 缓冲液

(4)便携多通道P4SPR表面等离子体共振分析仪

【实验/操作方法】

(1)配置PBS缓冲液

(2)配置硫醇化寡核苷酸溶液

(3)在SPR玻璃芯片上做蛋白质修饰

(4)将实验溶液缓慢恒定的通入到P4SPR分析仪中

【实验结果/结论】

Affinité的技术已用于测定蛋白质-DNA相互作用。  在该测定中,双链DNA片段在SPR芯片上杂交,以无标记方法监测与可溶性蛋白质的相互作用。该方法适用于任何硫醇化核酸链的应用。

 

Lacl repressor protein / dsDNA

application2.JPG

使用dsDNA对蛋白质进行分步检测

【仪器/耗材清单】

AffinitéP4SPR具有独特的方法来鉴别小型治疗药物的结合配体,并确定结合亲和力和结合动力学。蛋白质固定的简单性和仪器的易用性使这种方法在培训的几分钟内对任何人(本科生到宇航员,高级化学家到周末科学家)都会有一个直观的了解。

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