维生素K1是一种脂溶性的维生素,可在肝脏中合成,它的作用是促进血液凝结,临床上主要用于各种维生素K缺乏引起的出血性疾病的ZL。
如果使用含有维生素K1的化妆品会引起严重的过敏反应,因此,在我国《化妆品安全技术规范(2015版)》中已明确规定将其列为化妆品禁用成分。
2018年10月,化妆品中维生素K1的检测标准QB/T 5292-2018正式发布。本应用是参照上述标准,采用反相GX液相色谱方法并选用C18柱TSKgel ODS-100V来测定化妆品中维生素K1含量。
溶液的配置
色谱流动相配制:甲醇:异丙醇=85:15
混合溶液:乙醇:正己烷=4:1(体积比)
维生素K1标准工作溶液:称取10 mg维生素K1,用少量丙酮溶解,并用混合溶液稀释至1 mg/mL。取出少量母液,用混合溶液配制成0.2 mg/L、0.5 mg/L、2.0 mg/L、5.0 mg/L、20.0 mg/L的系列标准工作溶液,于4℃避光保存。
样品前处理
称取0.5 g化妆品,加入10 mL混合溶液涡旋混匀,超声10 min。取出部分溶液以10000 r/min离心10 min,上清液经0.45 μm微孔滤膜过滤待测定。
分析条件
仪器:Thermo Ultimate 3000
色谱柱:TSKgel ODS-100V(5μm ,4.6 mm I.D.×25 cm)
流动相:甲醇∶异丙醇=85∶15
流速:1.0 mL/min
柱温:室温
进样量:10 μL
检测器:UV@271 nm
分析结果
图1. 维生素K1标准品色谱图
图2. 某品牌防晒霜提取液的色谱图
(黑色:提取液、蓝色:加标)
图3. 标准工作曲线
实验结论
QB/T 5292-2018标准方法中维生素K1的检出限为1.5 mg/kg,定量限为4.0 mg/kg。采用C18柱TSKgel ODS-100V (5μm,4.6 I.D.mm×250mm)可以满足上述标准中检出限、定量限等相关要求。
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