用STS-UV微型光谱仪检测DNA的吸光度

我们通常用紫外吸收光谱来检测生物分子，获得其有关浓度和样品纯度的重要信息。 STS-UV微型光谱仪的波长范围在190-650 nm之间，光学分辨率约为1.5 nm，是此类检测的理想之选。 STS-UV微型光谱仪的体积小巧、功能强大、性能出色，在宽泛的样品浓度范围内能提供优质的紫外吸收数据。 在此应用说明中，我们通过测定浓度在0.15至150 μg/ml之间的DNA样品的吸光度，证实该光谱仪的jue佳性能。 

前言

DNA检测通常需要测试浓度极高或极低的样品，对于高浓度DNA溶液可进行稀释，而低浓度样品的检测难度更大。 没有可调节光程的光谱仪或小容量采样器更具比尔-伯朗定律，可将比色皿的光程调节为适合大小，从而符合测定多种浓度。 STS-UV的动态范围大，信噪比高，能检测浓度范围较大的DNA样品，而无需改变光程来适应0.005至1.5吸光度单位（AU）范围内的吸光度水平。

实验详细资料

用去离子水制备不同浓度的鲑鱼 DNA（Sigma D-1626）。 使用1 cm光程比色皿和DH-2000-BAL平衡型氘-卤钨组合式光源中的氘灯检测DNA的吸光度。

实验结果资料

图1.用STS-UV测量低浓度（0.15-2.5 μg/ml）DNA溶液的吸光度。

图2.OD260处对应DNA浓度（0.15至2.5 μg/ml DNA水溶液）

图1和2中显示了用STS-UV检测低浓度DNA（0.15-2.5 μg/ml DNA）的吸收光谱和在260 nm（OD260)下的吸光度值。 对这些浓度进行的重复测量显示差异率不到0.0004AU（误差条在数据标记内）。 用最小二乘法把观测数据拟合成直线，相关系数为0.9999，证实了低浓度数据的线性。 如图1所示，即使当吸光度数值低至0.005 AU时，STS-UV也能提供重复性高的优质DNA吸收数据。

图3.OD260与DNA浓度（0.15至110 μg/ml DNA水溶液）

图3进一步证实用STS-UV检测0.15-110 μg/mlDNA具有较好的线性和较宽的动态范围。 R²（线性拟合度）值为0.9996，说明了在这一宽泛的浓度和吸光度范围内数据具有线性关系。 当浓度为110 μg/ml时，吸光度曲线略微平坦化或衰减说明在100至110 μg/ml之间吸光度具有线性，约为1.6 AU。

图4.OD260与DNA浓度（0.15至150 μg/ml DNA水溶液）

图4显示了用STS-UV检测的ZD吸光度。 检测出吸光度数值高达2.1 AU。 正如红色的数据所示，在100和110 μg/ml之间DNA的OD260表现出较高的线性，约为1.6 AU。 当浓度超过100 μg/ml，光谱图平坦化或衰减说明了这些测量结果接近杂散光限值。

结论

STS-UV的动态范围为4600:1，信噪比超过1500:1，它将出色的性能融入体积小巧、功能强大的微型光谱仪中。 STS-UV是DNA、RNA和蛋白质检测的理想之选，覆盖了190至650 nm的整个范围，光学分辨率约为1.5 nm。 正如浓度在0.15至150 μg/ml之间的DNA样品所示，STS-UV能对宽泛的吸光度范围（0.005至2.1 AU）进行检测。 STS-UV能在宽泛的浓度和吸光度范围能进行检测，无需配备可调节的采样配件，从而简化了紫外吸收光谱的检测过程。