【概述】荧光定量PCR(qPCR)方法用途及说明
荧光定量PCR法(qPCR):是在常规PCR基础上,将『针对支原体特异性保守序列的探针』做荧光标记,使PCR扩增后的产物带有荧光,利用荧光信号的变化和配套软件,进行DNA扩增反应的实时监测,简称qPCR。
(经典法)
1) 符合欧洲药典、药典要求,更适合细胞,CAR-T,抗体药、疫苗等临床项目申报和质检。
2)样本需先做DNA抽提。抽提后样本加入量为10μl。
3) 厂家可协助完善方法验证步骤。
【实验/设备条件】支原体荧光定量PCR(qPCR)检测试剂盒(一步法)
1)适合科研单位检测,或单位内检,用荧光定量PCR(qPCR)法检测细胞或其他生物基质。
2) 比药典操作标准合并了一步,(将内控对照试剂预先混合在PCR mix试剂中),操作更简洁。
3)样本量为2μl,灵敏度为50个基因组拷贝/反应。结果准确。
【样品提取】
【实验/操作方法】优点:
①灵敏度高、特异性强。
②时间短,2-3小时出结果。
③检测结果可定量。
④操作简便。
缺点:
①对于已做支原体灭活处理的样品,由于支原体DNA仍旧存在其中,PCR结果会出现假阳性。(可用培养法做补充验证)
②不同厂家生产的试剂盒质量差异巨大(由于引物及内在设计不同),需谨慎选择,尽量在专业人员推荐指导下使用。
【实验结果/结论】
【仪器/耗材清单】试剂盒 PCR耗材
随着数字PCR技术应用的展开,越来越多实验室被其绝dui定量的方式、结果的高灵敏度、高重复性等特质所吸引。2
1.普通PCR与荧光定量PCR技术区别? 2.Sybr GreenTaqmanMolecular beaco
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公司地址:厦门软件园二期望海路23号成立日期:2002年1月18日企业性质:留学人员创业企业,高新技术企业,
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Eco 48通过快速而又极ng确的检测引领了这次业界的技术进步革命性的热块技术改进使得整个实验可以在40mi
小RNA(miRNAs)是一种内源性非编码蛋白的小分子RNA,它们是许多基础的细胞过程中基因表达的主要调节因