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新型复合模式色谱柱检测极性有机酸应用

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内容节点
概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单

【概述】

低分子量有机酸是一类广泛存在于自然界的有机物,很多样品基体中都已测出不同种类不同含量的有机酸。目前常用测定方法有 HPLC 法、 IC 法和衍生化 GC 方法。HPLC法分析有机酸时,通常在常规反相色谱柱上保留较弱,本文采用新型复合模式色谱柱,建立了3种有机酸的液相色谱分析方法,可得到良好的分析结果。色谱峰面积精密度(RSD)范围(2.17%~3.29%),标准曲线线性关系良好R2>0.999.本方法流动相条件简单,重复性好,可用于药品、食品中有机酸的检测。

【实验/设备条件】

2.1.3 乙腈(色谱纯,美国Thermo Fisher公司);实验用水为Thermo去离子水;磷酸二氢钠(色谱纯,百灵威公司)

2.1.4甲酸 、乙酸 、三氟乙酸 (色谱纯 ,SIGMASIGMA)


2.3色谱条件

色谱柱:Thermo Acclaim Mixed-Mode WAX-1 (150×3.0mm 3μm)

柱温:30 ℃;

进样量:5 μL;

流动相:A为25mM磷酸二氢钠(氢氧化钠调节pH至5.2),B为乙腈

             A:B=60 60:40

检测 波长: 210nm

【样品提取】

称取多肽药物样品 20mg于 10mL 具塞比色管中,加水至 10mL,超声提取 20min,取适量样品在 10000rpm 下高速离心 15min,取上清液过 0.45μm的滤膜后作为待测溶液。

【实验/操作方法】

灵敏度和线性范围测试

采用上述仪器分析方法,对3种有机酸 进行线性范围测试,线性相关系数 r2均大于 0.990.999,线性关系良好。 3种 有机酸线性范围 、线性相关系数 、LODLOD(S/N>3 3)及 LOQLOQ(S/N>10) 结果见表 2,化合物线性方程图见图1。

【实验结果/结论】

本文建立了液相色谱方法结合新型复合模式色谱柱对3种有机酸的检测方法。由实验结果可以看出,基于Thermo Fisher UltiMate 3000 GX液相色谱仪结合Acclaim® Mixed-Mode WAX-1 色谱柱的检测方法具有优异的灵敏度、稳定性和线性范围,可用于有机酸在制药和食品领域的常规分析检测。

【仪器/耗材清单】

2.1.1 Thermo Fisher UltiMate 3000 液相色谱仪

2.1.2 Thermo Fisher UltiMate 3000 RS Diode Array Detector



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