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Online-SPE法测定血清中抗精神病药物齐拉西酮的含量

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内容节点
概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单

【概述】


本文利用自动化样品前处理的Online-SPE 方法,借助强选择性、灵敏较高的荧光检测器,开发了JZ监测血清中齐拉西酮含量的方法。该方法具有灵敏度高、重现性好、耗时短等特点。从齐拉西酮的线性范围、重复性测试,到血清的加标测试,对血清中的齐拉西酮进行了完整的定量分析,系统地为临床个性化、更准确、更合理、更安全地用药提供一定的依据,提升临床的药物依从性,给患者提供更好的LX。

【实验/设备条件】

1.2.2色谱分析条件

色谱柱:Thermo AcclaimTM 120 C18色谱柱(250 mm ×4.6mm,5m)

萃取柱:SPE专用柱

柱温:30 ℃;

FLD :激发波长316nm; 发射波长415nm;采样频率5Hz;S=6

DGLC右泵(分析泵)流动相A:乙腈,流动相B:50mM 醋酸铵+0.2%甲酸水溶液

【样品提取】


1.1.3样品溶液制备

标样的配制:甲醇溶解,配置齐拉西酮储备液100mg/L,并稀释至需要浓度的溶液。

加标血清制备:用移液枪准确吸取1000 μL空白血清,分别加入适量齐拉西酮稀释标准溶液,配置成需要浓度的加标血样。

血液样品的配制:准确吸取1mL血清与10 mL离心管中,加入3mL沉淀试剂,涡旋混合20s,12000r/min下离心10min, 取上层清液加入到进样小瓶,等待进样。

【实验/操作方法】

精密吸取1mL空白血清,分别加入适量齐拉西酮稀释标准溶,配置成不同浓度的标准溶液,标品浓度分别为20.31、40.62、81.25、162.50、325.00和650.00ng/ml,进样体积为100ul。图5所示为标准曲线,线性回归方程为Y=267.38X+5566.49,R2=0.9979,表明在20.31ng/ml-650.00ng/ml浓度范围内线性良好,同时该方法空白血清样品在齐拉西酮出峰位置(10.28min)无基质干扰。由于齐拉西酮-甲醇标准溶液和血清样品溶剂差异较大,建议标准品的加入体积不超过血清样品体积的5%。

【实验结果/结论】

本文采用自动化样品前处理的Online-SPE 方法,借助HPLCFLD分析,开发了JZ监测血清中抗精神疾病类药物齐拉西酮的方法。该方法具有灵敏度高、重现性好和耗时短等特点。结果显示,此方法测定齐拉西酮的线性范围宽,在20.31-650.00ng/ml范围内保持线性良好,保留时间 RSD<0.10%,峰面积 RSD<1.00%,结果表明该方法重复性好,准确度高,且回收率在102.0%-105.6%,可用于定量分析血清中的齐拉西酮,系统地为临床个性化、更准确、更合理、更安全地用药提供可靠依据。

【仪器/耗材清单】


1.1.1Thermo UltiMate 3000 GX液相色谱系统UltiMate 3000系统;包括带在线脱气单元的双三元梯度泵、自动进样器(500ul 进样环)、柱温箱和荧光检测器;CDS变色龙色谱软件,版本7.2 SR6。



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