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牛奶中氯霉素检测的固相萃取方 法(Copure® C18)

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内容节点
概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单

一、样品提取 

准确称取牛奶 5.00 g( 精确到 0.01 g),加入乙酸乙酯 15  mL,涡旋振荡 1 min,摇床振荡 10 min;3000 r/min 转速离心 10 min。将上清液转移至试管中,于 45℃氮吹吹干,用 5 mL 乙腈 / 水溶液 (5:95, v/v) 溶解,待净化。

二、SPE 柱净化(Copure® C18,500 mg/6 mL) 

活化:C18 固相萃取柱使用前依次使用 5 mL 甲醇和 5 mL 水 活化。 

上样和洗脱:将待净化液加入已活化好的固相萃取柱中,以 1 mL/min的流速过柱,弃去滤液。用 4 mL乙腈 /水溶液 (5:95,  v/v) 分两次淋洗固相萃取柱,弃去淋洗液,抽干小柱。用 8  mL 乙酸乙酯洗脱固相萃取柱,收集洗脱液。 

重新溶解:洗脱液于 45℃氮吹吹干,用 1 mL乙腈 /水溶液 (2:8,  v/v) 定溶,0.22 µm 微孔滤膜过滤,供高效液相色谱测定。

三、仪器条件 

设备:Waters Alliance 2695 色谱柱:XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器:Waters 2487 紫外检测器 检测波长:268 nm 流动相:A:水 B:甲醇 洗脱方式:等度洗脱,A: B=40: 60 流速:1.0 mL/min 进样体积:20 µL 

四、实验结果 

表 1 牛奶基质中氯霉素的 0.5 mg/kg 添加回收结果


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