一、样品提取
准确称取 2.0 g 试样置于 50 mL 离心管中,加入 10 mL 乙腈, 于振荡器中振荡10 min,在4000 r/min下离心5 min,取上清液; 向离心管中重新加 10 mL 乙腈,重复提取一次,合并两次上清 液,于 50℃下氮吹至 2 mL,加入 4 mL 水溶解混匀,备用。
二、SPE 柱净化(Copure® HLB,200 mg/6 mL)
活化:HLB 柱使用前用 5 mL 甲醇活化,5 mL 水平衡。
上样和洗脱:取备用液加入固相萃取柱中,弃去流出液;各 取 5 mL 水、40% 甲醇水淋洗,弃去淋洗液;抽干小柱,用 10 mL 乙腈洗脱,收集洗脱液,于 50℃氮吹至近干(整个上样、 洗脱过程控制流速在 1 mL/min 内)。
重新溶解:加 1 mL 流动相(53% 乙腈水溶液)混匀,经 0.45 µm 滤膜过滤,供上机测试。
三、仪器条件
仪器:Waters Alliance 2695 色谱柱:InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器:Waters 2996 DAD 检测器 检测波长:285 nm 流动相:乙腈:水 =53:47 流速:1.0 mL/min 进样体积:20 µL
四、实验结果
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