一、样品提取
准确称取牛奶 1.0 g 于 15 mL 离心管中,加入 3 mL 水,加入 400 µL 0.25 mol/L 亚铁氰 化钾及 400 µL 1.0 mol/L 乙酸锌溶 液,超声混匀 5 min;4000 r/min 离心 5 min,取上清液。离 心管中继续加入 2 mL 水,重复提取一次,合并上清液备用。
二、SPE 柱净化(Copure® ACE,500 mg/6 mL)
活化:固相萃取柱使用前依次用 5 mL 甲醇、5 mL 水活化。 上样和洗脱:往固相萃取柱中加入合并上清液,收集流出液; 再加入 4 mL 水洗脱,收集合并洗脱液(整个上样和洗脱过程 流速控制在 1 mL/min 内)。 上机分析:洗脱液用水定容至 10 mL,摇匀,取 1 mL 过 0.22 µm 滤膜,供 HPLC 测试。
三、仪器条件
设 备:Waters Alliance 2695 色谱柱:XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5μm) 检测波长:214 nm 检测器:Waters 2487 紫外检测器 流动相:A:20 mmol/L 硫酸铵溶液 B:乙腈 洗脱方式:等度洗脱,A:B=75:25 流速:1.0 mL/min 进样体积:20 µL
四、实验结果
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