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玉米粉中玉米赤霉烯酮含量的免 疫亲和柱法(Copure® 玉米赤霉烯酮免疫亲和柱)

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概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单

一、样品提取 

称取 5.00 g(精确到 0.01 g)玉米粉到 50 mL 离心管,加入 1.0 g NaCl 和 20 mL 70% 甲醇水溶液,振荡 30 min,4000  r/min 下离心 5 min,取上清液 1 mL 于 15 mL 离心管中,加 水 4 mL,混匀待净化。 

二、免疫亲和柱净化(Copure® 玉米赤霉烯酮免疫亲和柱, 3 mL) 

上样:将 20 mL 上样器连接于免疫亲和柱上端,取待净化样品 1 mL 以 1-2 滴 / 秒的速度通过免疫亲和柱,弃掉流出的液体。 

淋洗和洗脱:加入 20 mL 水淋洗柱子,分两次淋洗,弃掉流 出的液体;抽干小柱;加入 3 mL 甲醇缓慢洗脱亲和柱,流速 约为 2-3 秒 / 滴。 

重新溶解:50℃下氮吹至近干,加 1 mL 50% 乙腈水溶液溶解, 0.22 µm 滤膜过滤,供 HPLC 分析。 

三、仪器条件 设备:Waters Alliance 2695 色谱柱:Inertsustain C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 

检测器:Waters 2475 荧光检测器 检测波长:激发波长:274 nm 发射波长:440 nm 流动相:A:乙腈 B:水 C:甲醇 洗脱方式:等度洗脱,A:B:C=46:46:8 流速:1 mL/min 进样体积:20 µL 

四、实验结果 

表 1 1.0 mg/kg 玉米粉中玉米赤霉烯酮的添加回收结果

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