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解决方案 | 分光光度法检测水中亚硝酸盐氮含量

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内容节点
概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单

导读

亚硝酸盐氮指的是水体中含氮有机物进一步氧化,在变成硝酸盐过程中的中间产物。


亚硝酸盐会对环境和生物造成严重影响,亚硝酸盐含量高的地下水被人或动物饮用后,生物体内血液中的低铁血红蛋白被氧化成高铁血红蛋白,从而失去携带氧的能力而引起组织缺氧,严重可致死。


水中亚硝酸盐还会引发致癌风险,亚硝酸盐在胃酸环境下与食物中的仲胺、叔胺、酰胺等反应生成强致癌物。因此,亚硝酸盐含量的测定非常重要。


本文参考GB7493-87《水质 亚硝酸盐氮的测定 分光光度法》对水中亚硝酸盐氮进行测量。

材料与分析仪器


实验原理

在磷酸介质中,pH值为1.8时,试份中的亚硝酸根离子与4-氨基苯磺酰胺反应生成重氮盐,它再与N-(1-萘基)-乙二胺二 盐 酸盐偶联生成红色染料,在540nm波长处测定吸光度。

实验仪器


image.png


UV-9000型紫外可见分光光度计

(上海元析仪器有限公司)

实验试剂

在测定过程中,均使用符合国家标准或专业标准的分析纯试剂,实验用水均为无亚硝酸盐的二次蒸馏水、亚硝酸钠、纯水


4-氨基苯磺酰胺(NH2C6H4SO2NH2)


N-(1-萘基)-乙二胺二盐 酸盐(C10H7NHC2H4NH2·2HCl)


磷酸:15mol/L,ρ=1.70g/ml



实验方法


01

标准溶液的配置  

显色剂:500ml烧杯内置入250ml水和50ml磷酸,加入20.0g 4-氨基苯磺酰胺,再将1.00g N-(1-萘基)-乙二胺二 盐酸盐溶于上述溶液中,转移至500ml容量瓶中,用水稀释至标线,摇匀。此溶液贮存于棕色试剂瓶中,保存于2~5℃,至少可稳定一个月。


亚硝酸盐氮标准贮备液(250mg/L):称取1.232g亚硝酸,溶于150ml水中,定量转移至1000ml容量瓶中,用水稀释至标线,摇匀。本溶液贮存于棕色试剂瓶中,加入1ml氯仿,保存在2~5℃,至少可稳定一个月。


亚硝酸盐氮中间标准液(50.0mg/L):取亚硝酸盐氮标准贮存溶液50.00ml置250ml容量瓶中,用水稀释至标线,摇匀。


亚硝酸盐氮标准工作液(1.00mg/L):取亚硝酸盐氮中间标准液10.00ml于500ml容量瓶内,水稀释至标线,摇匀。此溶液使用时,当天配制。


02

标准曲线的绘制

取6个50ml容量瓶,分别加入亚硝酸盐氮标准工作液0、1.00、3.00、5.00、7.00和10.00ml,用水稀释至标线,加入显色剂1.0ml,密塞,摇匀,静置。加入显色剂20min后、2h以内,在540nm的最 大吸光度波长处,用光程10mm的比色皿,以实验用水做参比,测量溶液吸光度。同时做空白试验。根据试验结果绘制标准曲线,结果如下:


C=15.36A+0.0384, r=0.995


03

  样品测量

如试样pH≥11时,可向试样中加入酚酞溶液1滴,边搅拌边逐滴加入磷酸溶液,至红色刚消失。经此处理,则在加入显色剂后,体系pH值为1.8±0.3。若试样pH<11,可直接进行测定。量取50ml水样于容量瓶中,用水稀释至标线,加入1ml显色剂,摇匀、静置。


加入显色剂20min后、2h以内,在540nm的最 大吸光度波长处,用光程10mm的比色皿,以实验用水做参比,测量溶液吸光度。同时做空白试验。



实验结果


01

样品测试结果

根据以上步骤测定所取样品的亚硝酸盐氮含量,测得结果为0.016mg/L。

02

回收率测试结果

在水样中分别加入0.03mg/L、0.15mg/L的标准溶液进行测定,进行加标回收率实验,测试结果分别为0.029mg/L和0.139mg/L,得到回收率在92.7%~96.7%。

03

精密度测定

取0.10mg/L的试样,重复测试11次,其RSD为0.07%。


结论


按照GB 7493-87《水质 亚硝酸盐氮的测定 分光光度法》,使用UV-9000紫外可见分光光度计测试水中亚硝酸盐氮,测得水样中亚硝酸盐氮的含量为0.016mg/L,重复性和精密度良好,试验回收率为92.7%~96.7%,实验结果符合要求,仪器可以满足此类实验的需求。


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