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应用方案 | 小麦粉中呕吐毒素检测的固相萃取方法

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内容节点
概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单

【概述】

呕吐毒素也叫做脱氧雪腐镰刀菌烯醇 (deoxynivalenol, DON) ,其是一种单端孢霉烯族化合物,由于该毒素能够引起动物呕吐等中毒症状, 故而称为呕吐毒素。小麦作为主食作物,是呕吐毒素分布最广的作物之一。

在小麦生产加工的过程中,呕吐毒素伴随着面粉的制成存在于小麦粉中,严重危及人们的身体健康。因此精 准快速地检测粮食作物及其制成品中呕吐毒素含量,对于保证食品安全具有重要的意义

【实验/设备条件】


LC方法

仪器设备:UltiMate 3000

(Thermo Fisher Scientific),配DAD检测器

色谱柱:Agilent ZORBAX  C18 

(4.6 mm×250 mm,5 μm)

流动相:A:甲醇    B:去离子水  

流动相梯度:见表1

流速:0.8 mL/min

柱温:35℃

进样体积:50.0 mL

检测波长:218 nm

image.png

表1  流动相洗脱程序

LC-MS/MS方法

仪器设备:液相色谱-串联质谱联用仪 

SCIEX Triple Quad™ 4500

色谱柱: C18 ,1.9 um,2.1x100mm 

流动相: A:水    B:甲醇

流动相梯度:

初始95%A(0 min~1 min)

95%~5%A(1.1 min~3 min)

5%A(3.1 min~3.5min)

95%A(3.51min~6.0min)

流速:0.3 mL/min

柱温:室温

进样体积:4.0 mL

离子源模式:ESI-

检测方式:多离子反应检测(MRM)

采集条件:见表2

image.png

表2 离子选择参数(注:*为定量离子)

【样品提取】

(1)称取2 g样品,再加入20 mL乙腈-水溶液(9+1)混合均匀。

(2)涡旋15 min后,6000 r/min离心5 min,取上清液,待净化用。

【实验/操作方法】

(1)向玻璃试管中加入10 mL样品提取液。

(2)将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中,并向下压净化柱至试管底端。

(3)将净化柱上部净化后的样品提取液取出至样品瓶或EP管中。

(4)取5 mL净化提取液,40℃下氮气吹干,用1 mL初始流动相复溶,涡旋30 s溶解残渣,过0.22 μm微孔滤膜,上机分析。

【实验结果/结论】

image.png

从图1中可知,经过Copure®230净化处理后,上机液中杂质被明显吸附,色谱图中杂峰更少,目标峰旁边无干扰峰,定量更准确;Copure®230的杂质去除效果明显优于国内B品牌,与国外A品牌相近,回收率在90-120%之间,满足实验使用需求。


image.png

【仪器/耗材清单】

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