【概述】
免疫印迹是研究蛋白质功能和定位的常用技术。通常,蛋白质样品可在SDS-PAGE上分离并转印至硝酸纤维素膜(NC膜)或PVDF膜上,然后用特异性抗体进行检测。与可重复利用Southern和Northern印迹的核酸技术不同,免疫印迹很难重复使用。
【实验/设备条件】
通过加热和去污剂剥离
• 标准印迹或印迹条,在硝酸纤维素或PVDF膜上。
• 封闭液。
• 剥离溶液:100 mM 2-巯基乙醇 (M301574)、2% (w/v) SDS (S108346)、62.5 mM Tris-HCl (T105291), pH 6.7。
• 磷酸盐缓冲盐(PBS):10 mM 磷酸钠、pH 7.2,0.9%(w/v)NaCl。
• 浅托盘,能容纳膜
• 阳性和阴性剥离对照。
【样品提取】
【实验/操作方法】
1. 在通风橱内,将印迹放入剥离溶液中,50 °C摇动孵育30分钟。
2. 将印迹放入缓冲液中,摇动10分钟。使用新鲜的缓冲液重复一次。
3. 可选: 重复初始检测操作(省略一抗步骤),
4. 以确保抗体已失活或从膜上剥离。
5. 将印迹放入缓冲液中,摇动10分钟。
6. 继续进行封闭步骤,进行下一轮的免疫检测。
【实验结果/结论】
1. 有利于昂贵或量少或珍稀样本的多次杂交;
2. 有利于用不同抗体分析单次印迹上的不同蛋白,比如不同亚型的抗体;
3. 有利于对异常结果进行重分析或确认;
4. 有利于纠正孵错的抗体;
5. 节约试剂成本,并节约时间。
【仪器/耗材清单】
近期,Pribolab公司将先进的分子印迹技术应用于霉菌毒素GX液相色谱(HPLC)检测领域,面向推出基于分
EVA胶膜的透光率和剥离强度测试方法介绍 摘要:EVA胶膜是一种以EVA为基材经过挤压成型工艺形成的热固性膜
药品包装用镀铝复合膜剥离强度的检测方法介绍 摘要:剥离强度是反映复合膜材料复合牢度的物理量,是复合膜材料的
摘要:无菌砖包装具有高阻隔性良好密封性等优点,可以满足食品内容物较长保质期的需求,但无菌砖的阻隔性及其物理机
摘要:EVA胶膜是一种以EVA为基材经过挤压成型工艺形成的热固性膜状热熔胶,与硅晶片玻璃背板粘接制成太阳能电
国标QB/T 2901牙膏用铝塑复合软管中对于牙膏用铝塑复合软管的剥离强度的测试作了明确的说明:如果剥离强度
标题:肉制品铝塑复合膜包装剥离强度检测及解决方案 摘要:剥离强度反映的是组成包装复合膜材料的各单层膜间的复合
吸塑包装是常用的一种包装用吸塑工艺生产出塑料包装,并用相应的设备对产品进行封装的总称将片材经过高温加热后经过
宠物食品包装的形式各种各样,用于不同规格的宠物食品的包装目前市场上常见的包装样式主要包括:铝和钢罐铝箔盘复合