方案背景
α- 羟基酸(Alpha Hydroxyl Acid,果酸,简称 AHA)是一类在分子结构的 α 位置具有羟基(或酮基)的有机酸,广泛应用于清洁、护肤等化妆品中,具有抗细胞衰老、增强皮肤细胞再生、促进角质层剥离和除皱等作用。但此类成分在使用中存在刺激皮肤、增强皮肤对紫外线敏感性等问题,其安全性越来越受到重视。因此,α- 羟基酸是化妆品卫生管理的一项重要指标。
我国《化妆品安全技术规范》2015 版中规定化妆品配方中的 α- 羟基酸总量不得大于 6%,国家药监局于 2019 年发布的第 12 号通告中提供了化妆品中 10 种 α- 羟基酸的检测方法(以下简称“通告方法”),该检测方法使用常规 C18 色谱柱(250 mm × 4.6 mm × 5 μm),一次分析需要 28 min,且部分样品在酒石酸出峰位置受到基质干扰,分离效果较差。
本实验采用 Agilent 1260 Infinity Ⅱ Prime 高效液相色谱系统和 Agilent Poroshell AQ-C18,4.6 × 100 mm,2.7 µm 色谱柱,建立了一种快速分析化妆品中 10 种 α- 羟基酸的方法。该方法一针仅需 12min,与通告方法相比,分析速度更快、分离度更好、分析效率更高。
安捷伦方案
色谱柱:Agilent InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18,4.6 × 100 mm,2.7 µm(部件号 695975-742)
柱温:25 °C
进样量:5 μL
DAD 检测器:检测波长 214 nm,参比波长 360 nm,采集频率 10 Hz
流动相 A:100 mmol/L 磷酸氢二铵溶液 (pH 2.8)
流动相 B:甲醇
梯度洗脱程序:
结果与讨论
10 种 α- 羟基酸分离色谱图
一针分析仅需要 12 min 即可快速分析 10 种 α- 羟基酸。
实际样品加标色谱图
实际样品中基质干扰峰与目标化合物实现分离。
小 结
本实验基于 Agilent 1260 Infinity II Prime 高效液相色谱系统,应用 Agilent Poroshell 120 Aq-C18,4.6 ×100 mm,2.7 µm 色谱柱,一针分析仅需 12 min 即可完成 10 种 α- 羟基酸的快速分离,分离度均可达到 2.5 以上,能够满足实际样品中干扰物质的分离。适用于化妆品中 α- 羟基酸的快速定量分析检测。
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