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仪器网/ 行业应用/ 解决方案/ 上海通微UM3000ELSD检测未衍生20种氨基酸的检测方法

上海通微UM3000ELSD检测未衍生20种氨基酸的检测方法

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内容节点
概述
实验/设备条件
样品提取
实验/操作方法
实验结果/结论
仪器/耗材清单
GX液相色谱-UM3000蒸发光散射检测器联用检测未衍生氨基酸
1.试剂与材料
1.1甲醇：色谱纯
1.2七氟丁酸：纯度98%
1.3三氟乙酸：纯度99%
1.40.2% 七氟丁酸（含0.1% TFA）溶液：精密吸取七氟丁酸1.00 mL，三氟乙酸0.50 mL溶于500 mL水，即得
1.5 标准品：甘氨酸丝氨酸天冬氨酸谷氨酰胺苏氨酸丙氨酸谷氨酸半胱氨酸胱氨酸脯氨酸赖氨酸组氨酸缬氨酸精氨酸甲硫氨酸酪氨酸异亮氨酸亮氨酸苯丙氨酸色氨酸，纯度均大于等于98%标准储备液
2.样品制备
极ng确吸取一定量氨基酸样品溶液，极ng确至0.001 mL，用水定容，使其中各氨基酸浓度范围在30 g/mL~300 g/mL之间取5 mL经0.22 m水系滤膜过滤后待测
3.GX液相色谱测定
10.1 推荐色谱条件
a)色谱柱：PrevailTM-C18，5 m，4.6 mm×250 mm（或相当型号色谱柱）
b)流动相：溶剂A，七氟丁酸：三氟乙酸：水=1.0：0.5：500；溶剂B，甲醇
c)梯度洗脱：梯度条件见表1
d)流速：0.8 mL/min
e)室温：常温（25）
f)柱温：35
g)漂移温度：40
h)载气流量：2.5 L/min（推荐使用氮气）
i)进样体积：10 L UM5000蒸发光散射检测器
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