凯氏定氮仪操作

1.定义：

凯氏定氮仪是根据蛋白质中氮的含量恒定的原理，通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含量的仪器。

2.原理：

将有机化合物与硫酸共热使其中的氮转化为硫酸铵。在这一步中，经常会向混合物中加入硫酸钾来提高中间产物的沸点。样本的分析过程的终点很好判断，因为这时混合物会变得无色且透明(开始时很暗)。

在得到的溶液中加入少量氢氧化钠，然后蒸馏，这一步会将铵盐转化成氨。而总氨量(由样本的含氮量直接决定)会由反滴定法确定:冷凝管的末端会浸在硼酸溶液中。氨会和酸反应，而过量的酸则会在甲基橙的指示剂下变色，用碳酸钠滴定所得的结果乘以特定的转换因子就可以得到结果。

3.适用范围：

凯氏定氮仪仪器用凯氏方法检测谷物、食品、饲料、水、土壤、淤泥、沉淀物和化学品中的氨、蛋白质氮含量、酚、挥发性脂肪酸、氰化物、二氧化硫、乙醇等含量。具有相当好的性价比，仅仅滴定过程需要人工操作一下，非常适合实验室及检验机构常规检测。广泛用于食品、农作物、种子、土壤、肥料等样品的含氮量或蛋白质含量分析。

4.操作步骤： 

4.1配制溶液

1、0.1mol/L HCl溶液(8.3mL浓盐酸溶于1000mL蒸馏水) 2、硼酸溶液 10g/L (20g硼酸于2L蒸馏水)3、溴甲酚绿指示剂(0.1%，无水乙醇，每L硼酸指示剂加入10mL) 4、甲基红指示剂(0.1%，无水乙醇，每L硼酸指示剂指示剂加入7mL) 5、400g/L NaOH溶液(800g NaOH固体于2L 蒸馏水，实验室外通风处配制) 6、硼酸指示剂配——将溶液2、3、4混匀搅拌，配制成硼酸指示剂。 

4.2样品消化

在通风橱进行样品消化实验，在样品中加入10ml浓硫酸和催化剂→长按开关开机→将样品放入消化炉→盖上盖子，并通水→4小时后，完成消化→长按开关键关机→将样品冷却后放在海绵上→结束

4.3样品测定

开关→开冷凝水→调整盐酸浓度(根据标定值)→恢复操作界面→按左右方向键选择Blank，Blank<0.2时才可开始→按左右方向键选择栏目，如mg(样品中含有多少mg蛋白质);mgN(样品中的N含量)→空管洗空白【程序5下操作，洗到小于0.5000mgN】→Blank【程序1下操作，Result调到“blank”，洗到小于0.1mgN】→测定样品【程序1下操作，Result调到“mgN”(酒红色→绿色→酒红色)】→清洗机器(测定完样品后，调到程序5下操作，Result调到“mgN”，洗到0.5000mgN以下)

4.4操作注意事项 

（1）程序5——清洗; 程序1——检测;

（2）用完后，往电极中加入蒸馏水，保护电极;

（3）在操过程中，若出现错误，排除故障，按enter键即可继续操作; 会有少许漏液现象，加样品时需向上推紧; 开冷凝水;

（4）若机器中出现积液，需将排液管抖一抖。