流式单细胞分选步骤

流式单细胞分选是对细胞（或微粒）的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术。

细胞分选步骤

1.在进行细胞分选之前首先应当做预实验，对流式细胞仪的测定条件进行优化，将分选门建立出来。流速和样品浓度根据目标细胞的含量进行调整。从而使目标细胞通过样品室的浓度为100-300个/秒，200个左右/秒Z好。

2.进入CellQuest，由Aquire菜单连机。

3.将CellQuest中存储的获取窗口打开，将优化后存储的仪器打开，对条件进行设置。

4.将样本管放在进样针处。

5.可以首先对一个数据资料进行收集，比较此数据与用分选后的样本收集的数据，来对分选样本的纯度进行确定。

6.从Acquiremenu选择SortSetup。

7.分选模式以样本中目的细胞的百分比及实验目的为根据来进行决定，分选用的门在SortGate中进行选择。如果选择NoGate（所有细胞），那么不分选只进行获取；如果在SortCount-中选择0，那么进行连续分选；SingleCell、Recovery、Exclusion的某种模式在SortMode中选择，不显示排除细胞数在AbortedCell中选择，之后点击ＯＫ。

8.对液流控制键RUN进行点击。

9.对获取控制窗口Aquire进行点击，在完成分选后对Pause，Abort进行点击。

10.将样本管取下，将1mL蒸馏水换上，对获取控制窗口Standby进行点击。

11.将收集锥型管取下，离心浓缩，用培养液重悬，根据实验所需条件来进行培养。

上样后的清洗

在完成分选之后，必须彻底消毒与清洁管路，从而保证分选系统管路无腐蚀、无结晶、不堵塞、不染菌。如果分选实验开始后，每周必须开机，用无菌蒸馏水充分的冲洗分选管路。