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化学发光免疫分析仪由于其具有灵敏度高,特异性强,方法稳定、快速等优点,已成为一种重要的非同位素标记免疫分析方法。新制造、使用中和修理后的化学发光免疫分析仪一般都要进行校准和测试。
化学发光免疫分析仪是用发光剂直接标记抗体的一类免疫分析法分析仪。
化学免疫分析原理是检测化学反应中,某些化学基因被氧化后形成激发态,当返回基态的同时发射一定波长的光子,利用这种化学基团标记在免疫分析的抗原或抗体上所建立起来的非放射免疫分析为化学发光免疫分析。此方法具有灵敏度高,特异性强,精密度好,线性范围宽,仪器设备简单,试剂价格低廉,方法稳定、快速等优点,已成为一种重要的非同位素标记免疫分析方法。
由于化学发光免疫分析仪的检测灵敏度和自动化程度非常高,因此它的准确度评价只能采用标准生化试剂在被检分析仪上严格按说明书操作,重复测量多次,看测定的结果是否与标准生化试剂的靶值相符合。
1、校准设备与试剂
标准生化试剂:免疫质控血清,不确定度为0.3%(k=2);移液管:50ml,A级;量杯:25ml;分度吸管:0.25ml,A级:电子交流稳压器:AC220V,1kW;混匀器。
2、校准工作环境
校准室内的温度为(20±5)℃:校准室内的相对湿度不大子80%;电源电压需经过电子交流稳压器的稳压:校准室内有较好的防尘措施:远离强电磁场的干扰。
1、外观
用目测检查化学发光免疫分析仪的涂漆,镀层和玻璃器件;用手拨动各旋钮,开关和样品台,以及检查紧固件情况:分析仪有关的技术文件应齐全,其铭牌应字迹清晰。
2、准确度的校准
仪器准备:化学发光免疫分析仪与标准生化试剂在校准室内的温度平衡时间应不小于2小时;接通电源预热15分钟,将分析仪各开关和旋钮按分析仪的说明书进行预调。
校准液的配制:本实验采用多项目免疫质控血清进行化学发光免疫分析仪准确度和重复性的校准。用移液管和分度吸管取5.00ml质控血清,并加复溶液5.00ml,置于25ml量杯中。
准确度测定:将装有校准液的量杯放置于混匀器中,混匀30秒;按常规测试方法用化学发光免疫分析仪测量,连续测量六次,舍去第—个测量值,其余填人原始记录,并计算平均值,判断其结果是否符合标准生化试剂证书中的靶值要求。
3、重复性的校准
调节好化学发光免疫分析仪,将开关断开再启动,测量校准液,重复测量六次,舍去diyi个测量值,记录结果并计算相对标准偏差,判断其结果是否符合标准生化试剂证书中的靶值要求。
在一次校准过程中要采用同一类型的免疫质控血清标准物质;免疫质控血清的复溶与稀释倍数应按照其使用说明中的要求;在配制校准中复溶液不可用其他液体代替;用后剩余的质控血清不宜保留做隔日测量,试剂中某些反应物质的化学性质不稳定,会扩散到溶液中去,导致污染而使结果会受到影响。
1、外观
化学发光免疫分析仪应附有产品说明书,产品合格证书以及配套附件;分析仪不应有影响工作性能的机械损伤;各旋钮,开关应定位准确,功能良好;样品台应平稳整洁;分析仪上必须标明型号,出厂日期,编号及厂名。
2、准确度
符合标准生化试剂证书中的靶值要求并优于10%。
3、重复性
符合标准生化试剂证书中的靶值要求并≤5%。
4、校准周期
经校准的化学发光免疫分析仪发给校准证书或测试报告,并标明校准或测试结果。校准周期不超过一年。
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