凝胶成像系统的原理|结构|分类

　　凝胶成像系统由紫外透射灯箱、白光灯箱、暗箱、摄像头、计算机系统，凝胶分析软件等组成，可在明室中操作。具有白光光源及三种波长的紫外光源，可单独使用其中某个波长的光源，亦可同时使用几种波长光源。

凝胶成像系统工作原理

　　凝胶成像系统通过样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样，以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。根据未知样品在图谱中的位置可以对其作定性分析，就可以确定它的成份和性质。

　　样品对投射或者反射光有部分的吸收，从而照相所得到的图像上面的样品条带的光密度就会有差异。凝胶成像系统光密度于样品的浓度或者质量成线性关系。根据未知样品的光密度，通过于已知浓度的样品条带的光密度指相比较就可以得到未知样品的浓度或者质量。这就是图像分析系统定量的基础。采用新技术的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均匀，Zda限度的消除了光密度不均造成的对结果的影响。

凝胶成像系统的组成结构

　　1、凝胶成像系统的控制系统

　　控制系统有三种规格：B型控制系统、T型控制系统和A型控制系统。控制系统的主要作用是控制凝胶图像系统的工作和运行。

　　2、凝胶成像系统的光源系统

　　光源系统的作用是：紫外光照射经EB染色的凝胶会发出明亮的荧光。不同波长的紫外光对不同染色的凝胶激发作用也不尽相同。

　　凝胶成像系统的光源的种类及用途：

　　凝胶成像系统的光源分为四种，分别是透射紫外，反射紫外，透射白光，反射白光。

　　①透射紫外：可激发多种荧光染料。光源波长302nm或365nm。

　　②反射紫外：紫外反射灯源使用并不广泛，主要是提供非透明材质的DNA跑胶载体如纸层析等的成像需要而使用。由于比较常用的还是透明的琼脂糖凝胶与聚丙烯酰胺凝胶，透射光源完全可以满足，因此凝胶成像中通常将紫外反射光源作为选配件不列入标配中。光源波长254nm或365nm。

　　③透射白光：用于可见光样品拍摄，例如蛋白样品胶的考马斯亮蓝或银染后的观察。

　　④反射白光：用于样品的定位和聚焦。

　　凝胶成像系统中常见的波长：

　　①紫外透射光源：302nm、365nm;

　　②紫外反射光源：254nm或365nm;

　　③镜头滤光片：595nm/590nm，537nm，620nm，460nm。

　　3、凝胶成像系统的暗室

　　凝胶成像系统暗室的作用是：经紫外光激发的EB胶发出的荧光在暗室中更加明亮，便于摄像机抓拍。

　　4、凝胶成像系统图像采集系统

　　凝胶成像系统图像采集主要由摄像机镜头及图像采集软件组成。摄像机的主要作用是抓拍发出荧光的凝胶图像。摄像机必须由高像素对弱光拍摄能力强科研及的相机。监控用的民用级及工业级摄像机用来对凝胶图像的抓拍均不清晰。图像采集软件的作用是将摄像机抓拍摄下来的凝胶图像传输入计算机。

　　5、凝胶成像系统的分析软件

　　凝胶成像系统的分析软件的主要作用是在计算机内对凝胶图像进行分子量、RF值等数据的分析。

凝胶成像系统分类

　　1、普通凝胶成像系统：可以对蛋白电泳凝胶，DNA凝胶样品进行图象采集并进行定性和定量分析，样品包括：EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、Radiant Red等染色的核酸监测;以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各种染色的蛋白质凝胶等(或UV、EB和有色及可见样品成像)。

　　2、化学发光凝胶成像系统：成像范围涵盖UV、EB、化学发光、紫外-荧光、有色及可见样品成像;

　　3、多色荧光凝胶成像系统：成像范围涵盖UV、EB、化学发光、多色荧光荧光、有色及可见样品成像;

　　4、多功能活体凝胶成像系统：UV、EB、化学发光、多色荧光荧光、有色及可见样品成像和离体组织和小型动物，及大型型动物。