液相色谱仪紫外检测器的原理及应用

　　液相色谱仪紫外检测器，是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器，其工作原理是Lambert-Beer定律，即当一束单色光透过流动池时，若流动相不吸收光，则吸收度A与吸光组分的浓度C和流动池的光径长度L成正比。

液相色谱仪紫外检测器是什么

　　液相色谱仪紫外检测器是应用Z广泛的一种检测器，当检测波长范围包括可见光时，又称为紫外-可见光检测器。紫外检测器不仅灵敏度高、噪音低、线性范围宽、有较好的选择性，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此可用于对光吸收小、消光系数低的物质进行微量分析。既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱。由于紫外检测器对流速和温度均不敏感，又可用于制备液相色谱仪。

　　在使用液相色谱仪紫外检测器时，要注意流动相中各种溶剂的紫外吸收截止波长，如果溶剂中含有吸光杂质，则会提高背景噪音，降低灵敏度。大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外或可见光吸收基团，因而有较强的紫外或可见光吸收能力，因此UVD既有较高的灵敏度，也有很广泛的应用范围，是液相色谱中应用Z广泛的检测器。

液相色谱仪紫外检测器的工作原理

　　当一束单色光透过流动池时，若流动相不吸收光，则吸收度A与吸光组分的浓度C和流动池的光径长度L成正比。其依据是光吸收定律，从光源发出的光经狭缝、滤光片、样品池到光电培增管上，使束由于样品浓度不同所引起光强的变化转换成光电流的变化，此光电流经放大器输入到对数转换器，使透光率T转成A输出。测出了A，就知样品浓度C。若从放大器直接输入记录仪，绘出的是样品透光率T变化的图谱，若从对数转换器输入到记录仪绘出的是样品光密度A变化的图谱。

液相色谱仪紫外检测器的应用

　　液相色谱仪紫外检测器分为固定波长检测器、可变波长检测器和光电二极管阵列检测器。按光路系统来分，紫外检测器可分为单光路和双光路两种。可变波长检测器又可分单波长(单通道)检测器和双波长(双通道)检测器。PDAD是80年代出现的一种光学多通道检测器，它可以对每个洗脱组分进行光谱扫描，经计算机处理后，得到光谱和色谱结合的三维图谱。其中吸收光谱用于定性(确证是否是单一纯物质)，色谱用于定量。常用于液相色谱仪对复杂样品(如生物样品、中草药)的定性定量分析。

　　液相色谱仪在使用紫外检测器分析检测时需注意以下事项，以保证检测器的灵敏度：

　　1、氘灯的光强受温度和电压影响较大，建议在恒温室内工作或者在冰库里工作;

　　2、T调零生产时机内已校准，当更换光电培增管后，需重新校准;

　　3、氘灯寿命可达数千小时，若发现记录仪不能调到10mV，且基线一直往小的方向漂移要考虑换灯。如氘灯不亮可再按一次电源开关，氘灯就会即亮，光电培增管寿命在数千小时以上。

液相色谱仪紫外检测器和荧光检测器的区别

　　荧光检测器：

　　主要用途：根据化合物具有荧光性质进行分析的，选择性高，只对荧光物质有响应。

　　特点：灵敏度也高，适合于多环芳烃及各种荧光物质的痕量分析。也可用于检测不发荧光但经化学反应后(一般进行衍生反应)可发荧光的物质。

　　缺点：不是所有化合物都具有荧光。

　　紫外检测器：

　　主要用途：基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器。

　　特点：①大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外或可见光吸收基团;②因而有较强的紫外或可见光吸收能力，因此既有较高的灵敏度;③广泛的应用范围，是液相色谱中应用Z广泛的检测器。

　　缺点：液相色谱仪该类检测器选择性较低，对于基质复杂的样品，在色谱定性和定量上会出现不准确。