制备液相色谱仪原理、结构及优势

　　制备液相色谱仪可以满足常规实验室纯化制备，并可根据使用需要，搭配紫外检测器组成等度系统，高压二元梯度系统，实现实验室制备提取。广泛用于制药、化工、食品、生化，环保等领域。

制备液相色谱仪原理

　　制备液相色谱是指采用液相色谱技术制备纯物质，即分离、收集一种或多种色谱纯物质。制备液相色谱仪中的“制备”这一概念指获得足够量的单一化合物，以满足研究和其它用途。制备液相色谱的出现，使液相色谱技术与经济利益建立了联系。制备量大小和成本高低是制备液相色谱的两个重要指标。

　　制备液相色谱仪特点：按照操作的样品量分为三种：半制备(≤100mg)、制备(0.1-100g)、大规模制备(≥100g)。色谱柱直径一般大于2厘米，主要用于工业化大生产。

　　制备液相色谱仪应用领域：科研、工业化大生产，尤其是化学、化工、制药行业的工业前处理步骤，应用十分普遍。

Waters Prep 100q SFC 制备液相色谱（点击图片查看产品详情）

制备液相色谱仪的结构

　　制备液相色谱仪是一种由储液瓶、高压泵、进样系统、色谱柱、检测器、废液瓶六部分组成的仪器。输液泵是液相色谱仪系统中Z重要的部件之一。泵的性能好坏直接影响到整个系统的质量和分析结果的可靠性。输液泵应具备如下性能：

　　①流量稳定，其RSD应<0.5%，这对定性定量的正确性至关重要;

　　②流量范围宽，分析型应在0.1~10ml/min范围内连续可调，制备型应能达到100ml/min;

　　③输出压力高，一般应能达到150~300kg/cm2;

　　④液缸容积小;

　　⑤密封性能好，耐腐蚀。

　　泵的种类很多，按输液性质可分为恒压泵和恒流泵。恒流泵按结构又可分为螺旋注射泵、柱塞往复泵和隔膜往复泵。恒压泵受柱阻影响，流量不稳定;螺旋泵缸体太大，这两种泵已被淘汰。目前应用Z多的是柱塞往复泵。

　　柱塞往复泵的液缸容积小，可至0.1ml，因此易于清洗和更换活动相，特别适合于再循环和梯度洗脱;改变电机转速能方便地调节流量，流量不受柱阻影响;泵压可达400kg/cm2。其主要缺点是输出的脉冲性较大，现多采用双泵系统来克服。双泵按连接方式可分为并联式和串联式，一般说来并联泵的流量重现性较好(RSD为0.1%左右，串联泵为0.2~0.3%)，但出故障的机会较多(因多一单向阀)，价格也较贵。

　　早期使用隔膜和停流进样器，装在色谱柱进口处。现在大都使用六通进样阀或自动进样器。进样装置要求：密封性好，死体积小，重复性好，保证ZX进样，进样时对色谱系统的压力、流量影响小。制备液相色谱仪进样方式可分为：隔膜进样、停流进样、阀进样、自动进样。

　　1、隔膜进样：

　　用微量注射器将样品注进专门设计的与色谱柱相连的进样头内，可把样品直接送到柱头填充床的ZX，死体积几乎即是零，可以获得Z佳的柱效，且价格便宜，操纵方便。但不能在高压下使用(如10MPa以上);此外隔膜轻易吸附样品产生记忆效应，使进样重复性只能达到1~2%;加之能耐各种溶剂的橡皮不易找到，常规分析使用受到限制。

　　2、停流进样：

　　可避免在高压下进样。但在制备液相色谱仪中由于隔膜的污染，停泵或重新启动时往往会出现“鬼峰”;另一缺点是保存时间不准。在以峰的始末信号控制馏分收集的制备色谱中，效果较好。

　　3、阀进样：

　　一般制备液相色谱仪分析常用六通进样阀(以美国Rheodyne公司的7725和7725i型Z常见)，其关键部件由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。由于阀接头和连接管死体积的存在，柱效率低于隔膜进样(约下降5~10%左右)，但耐高压(35~40MPa)，进样量正确，重复性好(0.5%)，操纵方便。

　　4、自动进样：

　　用于大量样品的常规分析。

制备液相色谱仪主要优点

　　1、开机进行自检。

　　2、单一波长标准灵敏度、高灵敏度吸收谱。

　　3、五波长、时间编程标准灵敏度、高灵敏度吸收谱。

　　4、显示错误提示信息：灯无点燃、灯能量不足、设定参数错误。

　　5、自动测定D2灯及W灯的开启次数、灯状态、灯点燃时间、灯能量、设定D2灯及W灯状态。

　　6、针对复杂混合物中各化合物在不同波长下的响应差异，用时间程序切换波长进行分析，与传统紫外-可见检测器相比，能够极大程度提高所有化合物的测定灵敏度。

　　7、制备液相色谱仪采用进口光电二极管阵列作为光电检测元件，无需任何机械部分调整、选择和改变波长，仪器使用过程中不会引起波长的改变，与常规的单色仪相比有良好的波长准确度和重现性，使得分析结果更加可靠。