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流式细胞仪(Flow cytometer )是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。下面让小编带你简单了解一下流式细胞仪的技术参数和应用。
技术参数
指标
为了表征仪器性能,往往根据使用目的和要求而提出几个技术参数或指标来定量说明。对于流式细胞仪常用的技术指标有荧光分辨率、荧光灵敏度、适用样品浓度、分选纯度、可分析测量参数等。
荧光分辨率
强度一定的荧光在测量时是在一定道址上的一个正态分布的峰,荧光分辨率是指两相邻的峰可分辨的Z小间隔。通常用变异系数(C.V值)来表示。C.V的定义式为:
C.V=σ/μ
式中,σ为标准偏差,μ是平均值。
在实际应用中,我们使用挖关系式σ=0.423FWHM;其中FWHM为峰在峰高一半处的峰宽值。现在市场上仪器的荧光分辨率均优于2.0%。
荧光灵敏度
反映仪器所能探测的Z小荧光光强的大小。一般用荧光微球上所标可测出的FITC(fluorescein isothiocyanate 异硫氰基荧光素)的Z少分子数来表示。现在市场使用仪器均可达到1000左右。
分析速度/分选速度
仪器每秒种可分析/分选的数目。一般分析速度为5000~10000;分选速度掌握在1000以下。
样品浓度
主要给出仪器工作时样品浓度的适用范围。一般在1010细胞/ml的数量级。
其它技术参数尚多,不再一一介绍。
应用
1.分析细胞表面标志
2.分析细胞内抗原物质
3.分析细胞受体
4.分析肿瘤细胞的DNA、RNA含量
5.分析免疫细胞的功能
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