紫外可见分光光度计检定方法及常见问题

　　紫外可见分光光度计具有较多的用途，能够完成实验室内化学测定、医学分析、生物检测、环境标物的追踪检测等，对我国医学、刑侦、化学、食品等领域的促进作用不言而喻。其准确性是实验室检测与化验结果可靠性的保证。因此，定期对紫外可见分光光度计进行检定是对该仪器的正常保养与维护，使其保持Z佳性能，延长使用寿命，更好的进行维护。

紫外可见分光光度计检定方法

　　一、波长准确度及其检定方法

　　波长的实际测定值和理论值相减，就是紫外可见分光光度计的波长的准确度。它在测试不同的仪器时，作用非常大，是非常关键的技术指标。在我国，计量检定工作，波长准确度是很重要的。检定紫外可见分光光度计的波长准确度有很多的方式，下面将通过两种方法进行寿命说明：汞灯和氘灯的利用。

　　1、汞灯

　　我国在对紫外可见分光光度计波长准确度进行检定时，很多的生产厂一般都广泛利用汞灯进行测试。具体的操作流程就是：将原光源拆下来，采用标准灯，对标准光源灯各条的特征谱线进行测试，波长准确度就是测量值和理论值做差。自利用汞灯进行测试的过程中，能量测量作为测量的方式，波段的范围设置在245-560nm范围之内，空气作为样品的参考系，光谱带的宽设置为2nm，再通过波长扫描。波长准确度就是汞灯的各特征波长的测量值和其相应的理论值之差。为了确保准确度，可以重复进行3次，波长准确度就选择3次的平均值。

　　2、氘灯

　　在对紫外可见分光光度计的波长准确度进行检测时，通常人们在选用标准灯时用氘灯。在仪器紫外区，由于氘灯的连续光谱优势，就会在紫外区作为光源。在可见区，由于光谱中波长为656.1nm和为486.0nm是很容易分离的，而且具有高的强度，谱线特征非常明显，所以对仪器波长准确度进行检定时可以利用谱线。在我国，对于仪器进行计量检定都会用波长准确度较为高的标准灯-氘灯。

　　二、波长重复性及其检定方法

　　多次测试波长之后数据符合程度，也就是多次测试波长的数据离散性就是波长的重复性。检定波长的重复性方法，操作简单。diyi种方法，测试波长的准确度之后，测试三次取平均值，波长重复性就是通过和3次测试中Z小值或者Zda值做的差;第二种，测试波长的准确度，要经过3次测试，波长重复性就是Zda值与Z小值之差。

　　三、光度准确度及其检定方法

　　光度的实际测定值和理论值之差就是光度准确度。它俩之间的差越小，测量就会更准确，光度的准确度就会更高。一般，表示紫外可见分光光度计光度的准确度有以下两种方式：①透射比误差或者透射比准确度，表示用TA(或△T);②吸光度误差或者是吸光度准确度，在表示用AA(或△A)时，要注意测量时具体的吸光度情况。

紫外可见分光光度计检定常见问题

　　一、杂散光的问题

　　杂散光的出现使得紫外可见光纯度降低，导致检测误差增大。如杂散光在紫外可见分光中所占的比例为0.9%，那么杂散光所发生的误差增大也几乎为0.9%。杂散光的存在标示着紫外可见分光光度计的准确性已经不符合检测要求。其产生与光学元件老化、不清洁、错位、损坏有关，也与整台机械光敏部位的密封不严有直接关系。

　　二、透射比的问题

　　透射比对样品吸光度具有较强的影响，两者关系式是A=-logT，A代表着样品吸光度，T代表着透射比，T存在较大的误差时，A的误差会更大。因此，一旦透射比不准确，紫外可见分光光度计检测得到的数据就更不准确。透射比的影响因素有波长、比色皿托盘不正、光密封不到位、光谱带宽变化等等，这些都会使透射比误差超差，造成仪器测量不准确。

　　三、基线平直度的问题

　　紫外可见分光光度计各参数中基线平直度非常重要。作为主要技术参数，基线平直度、噪声和漂移三者综合作用，使紫外可见分光光度计性能突出。虽然基线平直度也是噪声，但它是全波波长点的噪声，而紫外可见分光光度计的噪声仅是250nm和500nm这两处的光度噪声。两者区别还是很大的。一旦基线平直度的误差超出范围，光度计图谱就会出现扭曲或假峰值，使分光光度计的测量准确度大大降低。

　　四、其他需要注意的问题

　　1、检定员综合素质提升是前提。检定人员只有素质增强，才能提高服务质量，严格按规程要求进行检定。工作责心增强、耐心细致，减少人为检定误差，及时总结经验，主动提高检定技术，保证检定效果。

　　2、检定环境及条件要满足紫外可见分光光度计检定。因此，检定前，要对环境进行定期监控，掌握环境参数，满足条件方可检定。当发观条件不允许时，不可强行进行检定操作。

　　3、紫外可见分光光度计各参数检定方法选择要科学正确，严格按规程进行，防止方法的错选导致误差的超标。

　　4、紫外可见分光光度计是用电敏感元件，使用前需要预热。在检定时，同样要充分预热，使仪器内部各系统稳定，降低检定误差，保证检定效果和质量可靠。

　　5、紫外可见分光光度计安装和调试要有正规技术员辅导，避免人为损坏。而且要制定保养维护制度，设专人管理。此外，环境应清洁无尘、干燥且无其它电磁干扰等，并定期开机除湿。