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怎么确保细胞在培养箱内健康生长

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细胞培养箱是提供稳定的温度(37°C)、稳定的CO2水平(5%)、恒定的酸碱度(pH值:7.2-7.4)、较高的相对饱和湿度(95%),来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。细胞培养时,细胞可能会出现死亡的现象,那么就让小编带你了解一下细胞培养时应该注意哪些问题,以确保细胞在培养箱内健康的成长。

1.保证实验材料无菌

由于细胞培养箱内温暖潮湿,是真菌生长的良好环境,所以必须定期的对细胞培养箱进行清洁。除此之外,应该先用酒精擦拭干净培养瓶,移液管和其他相关的物品后,再将它们放入到超净台,防止污染。

2.处理培养物时要小心

温度不断的波动或者剧烈的摇晃都会严重影响细胞的生长。所以培养箱Z好要温度恒定,不晃动,放在离电动仪器较远的地方。除此之外,一次处理多个细胞系可能会对细胞的表型和基因型产生影响,所以应该尽量避免。为了确定细胞系的身份,还需要定期完成STR图谱的分析。

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3.正确解冻细胞

虽然解冻的操作步骤很简单,还是需要恰当的操作,防止细胞受到伤害。细胞不能够长时间暴露在高温的条件下。所以为了防止对DMSO直接造成伤害,应该先把冻存管放在37度的水浴中两分钟,然后再用条件培养基稀释。

4.使用对数生长期的细胞

细胞的培养过程总共分为停滞期,对数期和平台期三个阶段,这三个阶段分别代表了低细胞生长,高细胞生长和无细胞生长。细胞越有活力,细胞就越健康,分裂也就越快,在对数期以百分之七十到八十的汇合度存在。

5.传代前,不能让细胞完全汇合

贴壁细胞所占培养瓶表面积的百分比被称为汇合度。完全汇合表面贴壁细胞百分bai的占据了培养瓶的表面。如果细胞呈现完全汇合状态,那么就表面细胞不能够生长。所以要使用有活力的细胞。

6.选择良好的培养基

在细胞培养过程中,培养基影响着产品的质量,产量和成本。为了更好的实验结果,需要对每一种培养物进行培养基定制。

7.配置干粉培养基时要注意水的质量

比起干粉培养,液体培养常常会获得质量更高的结果。这或许与水的质量有关。

8.利用细胞代谢特性优化培养基

对使用过的培养基进行分析,对于鉴定必要成分(包括氨基酸和维生素)的代谢速率很有帮助。

9.避免细胞过度消化

为了实现贴壁细胞的传代,需要通过胰蛋白酶消化使细胞和容器结合的蛋白质。但是,细胞不能在胰蛋白酶中太长时间,否则胰蛋白酶会消化细胞表面的蛋白。

10.培养基不能持续使用抗生素

细胞培养物不能长时间在抗生素中,否则会出现对抗生素有着天然耐药性的菌株出现,潜在的污染可能会被掩盖在这种现象里。


2005-04-22 浏览次数:1137次
本文来源:https://www.yiqi.com/daogou/detail_3237.html
热门标签: 二氧化碳培养箱的两种加热方式细胞培养的注意事项细胞培养的步骤和设施器材细胞培养的营养条件
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