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大肠杆菌的应用与菌株分类

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大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli) 革兰氏阴性短杆菌,大小0.5×1~3微米。周生鞭毛,能运动,无芽孢。能发酵多种糖类产酸、产气,是人和动物肠道中的正常栖居菌,婴儿出生后即随哺乳进入肠道,与人终身相伴,几乎占粪便干重的1/3。国家规定,每毫升饮用水中的菌落总数小于100,每100毫升水中不得检出总大肠菌群。下面就让小编带你了解一下大肠杆菌在生物技术中的应用以及其分类。


大肠杆菌在生物技术中的应用:

作为外源基因表达的宿主,大肠杆菌具有清晰的遗传背景,简便的技术操作步骤,简单的培养条件,能够进行大规模发酵,是目前Z成功,得到Z广泛应用的表达体系,常常被作物GX表达的shou选体系,倍受遗传工程专家的重视。它的基因组DNA是拟核中的一个环状分子,能够同时有多个环状质粒DNA。大肠杆菌细胞的拟核有1个DNA分子,大约有4700000个碱基对那么长,大概有4400个基因分布在DNA分子上,每个基因平均大概有1000个碱基对那么长。



除了少数几个例外,在DNA重组实验中所用的菌株以及分子生物学中常用的大肠杆菌菌株均是大肠杆菌菌株K12的衍生物。在遗传、生化代谢等方面这些突变菌株各有不同程度的差异,对于做不同自菌株基因很适合。


分类

1:HB101菌株

特点:该菌株具有稳定的遗传性能,可以方便的使用,对于各种基因重组实验均适宜。

基因型:SCS110或thi-1M110,leuB6,mtl-1,xyl-5,rpsL20,galK2,lacY1,proA2,ara-14,recA13,hsdS20(rB-mB-),supE44。


2:T*P10菌株

特点:该菌株对于GX的DNA克隆和质粒扩增很适用,能够使得高拷贝质粒的稳定遗传得到确保。

基因型:nupG,(Strr)endA1,galK,rps,galU,araΔ139Δ(ara-leu)7697,recA1,△lacⅩ74,lacZΔM15,φ80,F-,mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)。


3:JM109菌株

特点:该菌株在用M13phage载体进行转染或使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时,因为JM09编码的LacZΔM15和载体DNA产生的LacZa多肽进行α-互补,因而使得β-半乳糖苷酶活性显示出来,因此重组体菌株很容易被鉴别出来。

基因型:Δ(lac-proAB)/F’,relA1,supE44,hsdR17,thi-1,gyrA96,endA1,recA1。


4:BL21(DE3)pLysS菌株

特点:该菌株由于含有质粒pLysS,所以具有氯霉素抗性。PLysS包含表达T7溶菌酶的基因,可以使目的基因的背景表达水平降低却不对目的蛋白的表达有所干扰。该菌株对于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达很适合。

基因型:dcm(DE3,pLysS,Camr),gal,ompThsdS(rBB-mB-),F-。


5:BL21(DE3)菌株

特点:该菌株被用来对克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因GX表达。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区,λ噬菌体DE3区在BL21的染色体上整合。该菌株对于非毒性蛋白的表达很适合。

基因型:dcm(DE3),gal,hsdS(rBB-mB-),ompT,F-。


6:DH5a菌株

DH5a菌株常被用于质粒克隆。E.coliDH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。可以起到对菌株进行蓝白斑筛选鉴别重组的作用。

基因型:relA1,gyrA96,thi-1,λ-,supE44,phoA,hsdR17(rk-,mk+),endA1,recA1,deoRΔ(lacZYA-argF)U169,,φ80dlacZΔM15,F-。


2005-05-14 浏览次数:4307次
本文来源:https://www.yiqi.com/daogou/detail_3449.html
热门标签: 肠出血性大肠杆菌的易感人群和治疗原则肠出血性大肠杆菌的发病机制肠出血性大肠杆菌的特性大肠杆菌生长曲线的测定
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