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基础培养基添加血清、抗生素等物质后,叫完全培养基,也叫(血清)细胞培养基。基础培养基只能维持细胞生存,要想使细胞生长和繁殖,还需添加天然培养基,常用的是牛血清,因为牛血清中含有促细胞增殖的各种生长因子和其他多种有利于细胞生存的物质。此外为防止污染,培养液中尚需加一定量的抗生素。 完全培养基根据添加血清量的多少,可分为细胞生长培养基和细胞维持培养基,用于不同细胞和不同研究。
培养方法
在含有微量(<0.01%)蛋白胨的基本培养基平板上接种诱变处理后的细胞,较大的菌落就由野生型细胞迅速生长而成。小菌落则由营养缺陷型则缓慢生长而成。如果某一特定营养缺陷型需要被获取,那么可以再将微量的相应物质向基本培养基中加入。在基本培养基中加入抗生素,野生型菌株被杀死,营养缺陷型能在基本培养基中生长而被保留下来。完全培养基在需要对细菌进行分离培养时会被用到。被培养的微生物生长之所以较快,是由于营养成分较全面。
培养基介绍
完全培养基(Complete medium)是将一些富含氨基酸、维生素和碱基之类的天然物质加入到基本培养基的天然物质。各种营养基是由于加入生长因子而制成的,微生物的各种营养缺陷型菌株的生长需要能够得到满足。完全培养基按照添加血清量的多少,可分为细胞生长培养基和细胞维持培养基,用于不同细胞和不同研究。
生长培养基
细胞生长培养基(液)含有较大比例的血清,它的作用是对细胞生长增殖进行维持。培养细胞工作中Z主要的培养用液是生长培养液。基础培养基80%~90%,血清(多用小牛血清) 10%~20%,抗生素(多用青霉素100U/mL和链霉素100μg/mL)是其的主要成分。这是适用于一般细胞的培养液组成。为培养特定细胞,还要选择适应性培养基,可能尚需添加基本培养基中缺少或该细胞需要的成分。
维持培养基
维持培养基含有极少比例的血清,它的作用是维持细胞缓慢生长或不死的培养液。但发生转化或癌细胞因自身有产生促生长增殖因子的能力,虽在血清缺少情况下仍能生长;因此维持液可用于选择发生恶性转化的细胞。其组成为:基本培养基95%,血清2%~5%,抗生素(多用青霉素100U/mL和链霉素100μg/mL)。此处需注意,如培养正常细胞完全不加血清,可维持细胞不死,但时间过长细胞难免退化。
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