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Real-Time PCR 技术,又称实时定量荧光PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,Z后通过标准曲线对未知模板进行总量分析或通过Ct值对模板进行相对定量。
介绍
荧光定量PCR的光学系统
荧光检测系统
旋转机制:
(1)成本低廉,高温均一性好。
(2)不太容易操作,对于低温储存不支持。
(3)需要特殊的加样支架和耗材
扫描机制:
(1)检测时间之后,需要更多的检测时间。
(2)价格便宜,操作方便,校正容易。
CCD:
(1)能够同时检测。
(2)价格不便宜,校正很困难。
激光光源
Lamp
(1)对于多通道以及多种不同的光路颜色都适用
(2)对2D传感器方案唯yi适用
(3)对高能量分析系统适用
LED
(1)一般用于孔扫描模式
(2)有比较多相对可选的光路颜色
(3)价格和维护的成本比较低
Laser:
(1)只能够在逐孔扫描模式下使用
(2)光路的颜色有限
(3)价格和维护的成本比较高
(4)能量高,信号不容易受到干扰。
热模块系统
空气离心加热模块
1.不方便加样
2.偏低的通量(32或者72)
3.比较差的温控准确性
4.很好的温度均一性
5.比较快的升降温度(高于每秒5摄氏度)
半导体加热模块
1.比较差的温控均一性
2.比较慢的的升降温度
3.很好的温控准确性
4.比较方便加样
5.有很高的通量
荧光定量PCR仪的选择标准
1.灵活性
2.运行速度
3.硬件设计特点
4.耗材的开放性
5.仪器的通道数量
6.仪器的检测通量(反应孔数)
7.仪器使用的广泛程度
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