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按照标记物的不同,可以将化学发光免疫分析法分为直接化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析以及电化学发光免疫分析法。
分类
直接化学发光免疫分析
使用吖啶酯对抗体(抗原)进行直接标记,和待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应,使固相包被抗体-待测抗原-吖啶酯抗体复合物,此时,仅要将NaOH和氧化剂(H2O2)使得环境变为碱性,不需要催化剂对其催化,吖啶酯也能够分解、发光。
通过集光器和光电倍增管对单位时间内所产生的光子能进行接收和记录,光的积分和待测抗原的量成正比,待测抗原的量能够通过标准曲线计算出来。
化学发光酶免疫分析
酶反应的底物是发光剂, 操作步骤与酶免分析完全相同。
电化学发光免疫分析
在电化学发光免疫分析系统中,固相载体包被抗体(抗原)为磁性粒子,抗体(抗原)采用三联吡啶钌来进行标记,在反应体系内待测标本和相应的抗原(抗体)发生免疫反应之后,就有抗体-待测抗原三联吡啶钌抗体复合物形成,这时,在流动室內吸入上述复合物,与此同时,将TPA缓冲液引入。当磁性粒子子电极表面流经时,受到了安装在电极下面的电磁铁的吸引,而缓冲液会将没有结合的标记抗体和标本冲走。与此同时向电极施加电压,将电化学反应启动,在电极表面进行三联吡啶钌和TPA的电子转移,使得电化学发光产生,光的强度和待测抗原的浓度成正比。
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