基因组DNA提取方法SDS法

核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来使得样本核酸提取工作自动完成的仪器。其在环境微生物检测、食品安全检测、输血安全、法医学鉴定、疾病控制ZX、临床疾病诊断、生物学研究以及畜牧业等多种领域得到广泛地应用。下面就让小编带你了解一下SDS法。

SDS法原理：

SDS为一种阴离子去垢剂，在高温（55-65摄氏度）条件下可以使细胞裂解，使染色体离析，蛋白质变性，从而使核酸释放出。将高盐（NH4Ac或者KAc）的浓度提高并且将温度（冰浴）降低，沉淀蛋白质以及多糖杂质，离心后将沉淀去除。使用酚或者氯仿对上清液中的DNA抽提，反复抽提以后使用乙醇将水相中的DNA沉淀。

SDS提取缓冲液的配方以及作用

1、终浓度50mM Tris-HCL(pH 8.0)

作用：为了避免核酸被破坏，Tris-HCL(pH 8.0)提供了一个缓冲环境。

2.终浓度20mM EDTA(pH 8.0)

作用：EDTA螯合锰离子或者镁离子，使DNase活性得以YZ。

3.终浓度0.4M NaCl

作用：NaCl提供了一个高盐环境，充分溶解DNP，在液相中存在。

4.终浓度2％SDS

作用：SDS在高温（55-65摄氏度）条件下裂解细胞，使蛋白质变性，释放出核酸。

SDS法实验流程

动物组织-液氮研磨或者匀浆-细胞裂解-抽提-上层溶液-酒精沉淀-离心洗涤-干燥溶解-DNA溶液

SDS法应用

SDS法对于如动物组织、细胞、全血、细菌以及酵母等大部分实验材料基因组DNA提取。