核酸提取过程洗涤目的以及乙醇沉淀方法

核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来使得样本核酸提取工作自动完成的仪器。其在、输血安全、法医学鉴定、疾病控制ZX、临床疾病诊断、生物学研究等多种领域得到广泛地应用。

洗涤目的：

对于核酸提取过程而言，洗涤亦是十分重要的步骤。首先必选悬浮起沉淀来。其次是一定的时间的控制，特别是如果有比较大的核酸沉淀。其三为多次少量。Z后是要彻底去上清。将上清倒掉之后在吸水纸上倒置片刻是大部分资料中的基本操作。若离心管经过硅化，质量好，由于液体几乎不挂壁，因此能够非常彻底地去除上清；质量好的管子，尽管没有经过硅化，只会有非常少的残留量，不会出现什么问题；差的管子会出现非常多的液体的挂，有非常多的残留量，会对后续的实验产生影响。将液体倒掉以后再进行短暂离心，用移液器吸出残液，是使液体残余得以防止的一个好方法。

还有必须牢记的是，上一步操作中的杂质会留在残液中，混匀程度、核酸沉淀的大小决定了其残留量的多少。杂质不能够通过挥发去除，乙醇可以通过挥发去除。这个步骤，用手甩不可以，如果这样，核酸很容易被甩掉。除此以外，洗涤的强度也取决于裂解液的裂解能力和核酸沉淀的大小。沉淀越大，裂解液就会有越强的裂解能力。放置相对比较长一点的时间，增加洗涤次数，就能够更加彻底的洗涤。当然，还有一个至关重要的因素为乙醇浓度的选择，通常情况下，洗涤一定要选用室温的75%乙醇。

乙醇沉淀法

是乙醇沉淀法是对于核酸的浓缩得到Z为广泛应用的酸浓缩方法。在中等浓度下存在单价阳离子的时候，将一定量的乙醇加入之后，能够通过离心回收所有形成的核酸沉淀。甚至能够定量回收低至pg量的DNA或RNA。回收的核酸能够根据所需浓度再次在适当的缓冲液中溶解。在具体操作核酸浓缩时，能够将V/10单价阳离子盐贮存液2V无水乙醇加入到含样品的小离心管中，混合均匀，在冰水浴中放置15～30分钟，取出目测平衡，0～4摄氏度，12000 ?g，离心10分钟。吸取去上清，除此以外，再将0.5～1ml乙醇加入，12000 ×g，0～4摄氏度，离心2分钟。吸取去上清，打开盖子将沉淀晾干或者用油泵将沉淀抽干之后，在适当体积的缓冲液中溶解。选择单价阳离子盐是主要以下述考虑为基础，dNTP的共沉淀能够使用醋酸铵来减少，然而在之后用来磷酸化核酸时，应当对醋酸铵避免使用。由于T，多核苷酸激酶的强烈YZ剂有铵离子，由于在乙醇中LiCl有很高的溶解度，因此，当使用较高浓度的乙醇沉淀RNA时一般使用LiCl。醋酸钠（pH5.2）大多用于DNA和RNA沉淀，NaCl用于含有SDS的核酸样品。