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基因工程技术是基于分子生物学等发展学科,使对生物遗传物质新组合进行构造的能力为人类所获取,基因枪为基因工程技术(亦称重组DNA 技术)的一个重要组成部分,其实际上是以在体(in vivo)或离体(in vitro)的方式往靶细胞核内导入外源基因的技术。
优势
在棉花转基因技术中,农杆菌介导法有着非常广泛的应用。在国际上,农杆菌介导法变得越来越普遍,而且进展相当大。20多个棉花品种的GX、稳定的规模化转化体系为ZG农科院棉花研究所成功建立,使流水线操作得以实现,使GX、工厂化的棉花转基因技术体系建立了。
虽然无论理论还是实践,农杆菌介导法均是比较完善的一种转化技术,并且对于双子叶植物的转化已经得到广泛地应用,然而宿主基因型范围限制了该方法。此方法具有非常烦琐复杂的转化程序,难以进行很多优良品种的转化。
基因型、种属虽然不会对花粉管通道转化法进行限制,然而其没有较为完善的转化技术,所以,行之有效的基因转化技术需要被发展出来。
在2013年,一种棉花的基因枪活体快速转化方法由ZG农业科学院棉花研究所叶武威等人开发出来,利用第三代便携式基因枪和优化转化的参数使活体转化时对花蕾和花粉形成微创伤,从而将获得转基因植株的周期大大的缩短。
以下为该方法的操作步骤:
1、通过基因枪轰击的方法,往父本棉花的花粉中轰入含有外源基因的载体。
2、往活体母本棉花中授基因枪轰击后的父本花粉。
3、转基因棉花种子即是授粉后的母本棉花所结的种子,使棉花的基因转化得以实现。
组织培养步骤在该方法中没有必要,基因转化直接在活体棉花上就可以实现,操作简单,使用,对组织培养不依赖,有较好的稳定性。
用途
基因导入仪除了在各种微生物以及动物、植物细胞的电穿孔方面应用广泛,也能够用来研究基因导入和细胞杂交、融合。
操作直观、简单,对电容、电阻的设定范围进行了细化。在相关条件下使细胞的电穿孔实验具备更加宽广的选择。当如人类和小鼠等真核细胞导入基因时,必须将特殊的电缓冲液加入,以便使基因受体细胞导入率及存活率得以提高。特殊的电缓冲液没有必要在大肠杆菌等原核细胞和酵母时使用。
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