基因枪如何操作

基因枪技术又叫做微粒轰击技术或者生物弹道技术，是通过高压气体加速或者huo药爆炸直接往完整的组织或者细胞中送入包裹了DNA的球状金粉或者钨粉颗粒的一种技术。

基因枪的操作方法

准备材料

将一薄层培养基铺在9cm培养皿上，在培养皿ZX平铺材料，直径在3cm范围内。

处理金粉

在离心管中放置60mg金粉或钨粉，将无水乙醇1m1加入，经过3min的充分振荡，以9615g离心1rain,去上清再将无菌水1m1加入，混匀充分之后，以9615g离心，将以上步骤重复三次。Z后在1m1无菌蒸馏水中悬浮金粉，储存在室温下或者4摄氏度下。

处理DNA

将50tA金粉悬浮液去除，再将5rd的质粒DNA溶液、亚精胺依次加入，经过3rain的振荡，放置在室温下10min,以9615g离心10s,弃上清，将无水乙醇250l加入，振荡后以9615g离心10s,弃上清。沉淀重新在水乙醇中悬浮。

操作基因枪

在无菌条件下进行基因枪的所有操作，步骤如下:

1、基因枪表面及样品室使用70%乙醇进行消毒。固定工具、微弹载体及其固定器、阻挡网和可裂圆片使用70%乙醇浸泡15min后，然后放在超净台上晾干。使用70%乙醇对可裂膜片、固定盖、微弹载体发射装置的表面进行灭菌，吹干。

2、在固定环中嵌入微粒载片，在微粒载片ZX加入DNA及金粉的混合物，干燥大约1min。

3、在其托座上安装可裂膜，顺时针拧到气体加速器上。

4、安装好固定环(带有微粒的面朝下)、微粒载片、阻挡网托座、阻挡网、和空间环，将盖子旋紧，在枪入插入。

5、在轰击室中放入样品，将门关好。

6、将氦气瓶的总阀打开，顺时针转氦气调节阀,使得氦压表指针的示数超过可裂膜压力。

7、将基因枪及变压器开关打开。

8、将真空键按动，当真空度至26-28inHg=88.05~94.82kPa时,将Hod键迅速按下，接着将发射键(fire)按住，并保持不动,直到激发为止，接着将发射键关掉，再将Ho1d键关掉。

9、将通气键按住，直到归零真空表，然后将样品取出。

10、关机。旋紧氦气瓶的总开关，打一次空枪,归零氦压表指针以后，再将氦压表调节阀逆时针旋转，将基因枪的总开关及变压器开关关闭。