全基因合成介绍

在体外人对双链DNA分子合成的技术，即是基因合成，不同于寡核苷酸合成：寡核苷酸是单链的，大约100nt为其所可以合成的Z长片段。基因合成却是双链DNA分子合成，50bp-12 kb是可以合成的长度范围。

介绍

DNA又叫做氧核糖核酸，其为染色体的主要化学成，同时基因也是由其组成的。有时又被叫做“遗传微粒”，因为在繁殖过程中，子代复制了父代的一部分DNA，从而使性状的传播完成了。作为生物分子，DNA是十分庞大的。10E9个碱基对为真核生物的DNA分子量。10E6个碱基对为原核生物的DNA平均分子量，几千到几十万个核苷酸为病毒的分子量。

根据每个基因平均为1000个碱基对粗略的计算。高达200万个为人类细胞的基因数目，3000－4000个基因为大肠杆菌的基因数量。尽管有些基因，尤其真核细胞内的一些基因是多拷贝的，有多个或者非常多个在基因组内，事实上，推算的基因数要远远超过实际基因数。虽然这样，原核细胞和真核细胞基因组内依然具有非常惊人的基因数目。

何为基因，应当在对全基因合成解释之前先了解一下：

1、基因在细胞的染色体上存在，作直线排列，是生物体遗传的基本单位。

2、生物体内任何具有自主复制能力的Z小遗传功能单位，叫做基因。通过直线排列，具有特定核苷酸序列的核酸片段是其物质基础，染色体是由众多基因构成。670000大概是每个基因的相对分子质量。1000-1500b大概是每个基因的范围。

3、在细胞内存在的能够自体繁殖的遗传单位，叫做基因。

4、基因为一个具有遗传功能的特定核苷酸序列的DNA片段。

5、对一条多肽链的DNA片段或RNA进行编码，叫做一个基因。

通常而言，分子较小而又不易得到的基因会采用全基因合成的方式。能够将X链基因分成若干寡核苷酸单链片段（特为是100 个核苷酸以上的待合成基因），对每个片段长度进行控制，在40~60个碱基，并且大约有6个碱基交叉重叠在每对相邻互补的片段之间。磷酸化体外的所有片段（基因两端末端除外），若需要和亚克隆连接的方法，Z终，完整的基因由亚克隆的较大片段重组而成。当对分步连接、亚克隆的方法进行采用的时候，应当设计合适的酶切位点于片段两侧，为基因片段从亚克隆中回收提供便利。因为能够分别鉴定每个亚克隆，所里能够使得顺序错误的可能性有所减少。