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用于和DNA或RNA结构类似的寡核苷酸合成的自动化仪器,即是DNA合成仪。通常用于固相合成法,每次在长的寡核苷酸链上接入一个核苷酸。加入每一个核苷酸均通过相同的化学反应和相应的嘌呤或嘧啶碱基衍生物作用。仪器不同,所用化学反应和操作细节也会随之发生变化。DNA合成的磷酸酰胺法得到了非常广泛的应用。
发展
GX率、高产率的仪器的开发与研究、应用领域的开拓和机器性能的完善为当前DNA合成仪的主要生产厂商的致力方向。
全世界di一台高密度复制DNA合成仪已经为台湾科学委员会“基因医药卫生科技研究计划”中的基因生物技术组成功研发出来,每天能够对768条DNA进行合成,能够同时对384条不同DNA进行合成。并且能够和聚合酶连锁反应装置相配合,对各种基因大量复制,除了对时间进行节省外,还能够对大量人力进行节省。这部机器能够将防伪基因、动物、人体、植物的基因甚都复制出来。
因为目前DNA合成仪可以合成的Z长核酸链的碱基对数量对于人们所需要的大部分核酸的碱基对数量来说还远远不够,所以,还需要对合成工艺不断地进行改善,才能够使较长的核酸分子得到。
不断涌现出按照不同化学方法研制的DNA合成仪,可以将现有核酸合成的碱基对数量限制突破,使大量人力、物力、财力得以节省,以便将来能够对酶的结构进行改变,使其在工业上更有价值。对蛋白质和多肽的结构进行改变,使新药物得以制备,并且对有关人类疾病和遗传调控的新领域进行了开拓。
有效方法
分离和制造目的基因的一些有效方法在基因工程学工作者艰苦细致的探索研究下已经掌握了。通常而言,目前有反向转录法、基因组扩增法、人工合成三种获取目的基因的方法。
1、人工合成
全长引物根据某一蛋白质的基因序列或氨基酸序列,进行设计,模版DNA通过OVERLAP方法来形成,再利用PCR扩增的方法使双链DNA得到,之后在克隆载体或者表达载体中转化克隆PCR产物。目前为止,速度Z快,准确率Z高的方法是化学合成全基因,同时能够以密码子在不同宿主细胞的不同的实验需求和偏爱性,对基因序列进行设计,使表达水平得以提高。
2、反向转录法
对于分子量较大而又不知其序列的基因,反向转录法比较适用,其的模板为目的基因的mRNA,对上下游引物进行设计,对反转录酶合成碱基互补的DNA片段进行借助,然后再在DNA聚合酶的作用下将双链cDNA合成,也就是目的基因的双链DNA。
3、基因组扩增法
基因组能够通过基因组抽提试剂盒直接从细胞、植物、血液、动物组织中分离出来,对特异扩增的引物进行设计,模版利用抽提的基因组,直接通过PCR扩增来对目的基因进行获取。
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