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紫外分析仪分为很多系列,有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列,不同的紫外分析仪有不同的用途。紫外分析仪采用不同波长引进电泳分析、检测,PCR产物检测,DNA指纹图谱分析,纸层分析或薄层分析等。
分子生物学和生物化学研究中荧光技术的应用
1、生物大分子的物理化学特性和其分子的结构的研究
除了分子内荧光发色基团的本身结构对于荧光的激发光谱、发射光谱、量子产率和荧光寿命等参数会产生影响,并且发色团周围的环境也会强烈地影响着这些参数。对于荧光发色团所在部位的微环境的特征及其变化的研究能够利用此特点对定上述有关荧光参数的变化进行测定来获得。在该研究中,不但能够对生物大分子本身具有的荧光发色团(如色氨酸、酪氨酸、鸟苷酸等,此类荧光称为内源荧光)进行利用之外,还能够在生物大分子的某一部位共价地结合或吸附一些特殊的荧光染料分子,生物大分子的研究能够通过对该染料分子的荧光特性变化的测定来获得,这种染料分子被叫做“荧光探针”,它们发出的荧光通常叫做外源荧光。荧光技术在分子生物学中的应用范围由于荧光探针的应用得到了大大地开拓了。
2、生物大分子中的能量转移现象的研究
生物大分子中的能量转移现象的研究可以通过对荧光寿命、量子产率等参数进行利用来进行。生物大分子内部的许多信息能够通过对该现象的研究来获得。
3、物质的定性
荧光物质不相同,激发光谱和发射光谱也会有所差异,所以,鉴别物质可以使用荧光,荧光法相比于吸收光谱法选择性更加的高。
4、定量测定
样品中荧光组分的含量的定量分析可以利用在较低浓度下荧光强度与样品浓度成正比这一关系,在氨基酸、蛋白质、核酸的含量的测定经常使用。
较高的灵敏度是荧光定量测定的一个优点。此优点能够大大减少测定时所需要样品量。酶催化的反应也能够应用这种定量测定方法,只要有荧光强度的变化发生于反应前后,就能够对酶的含量及酶反应的速率等进行测定。
荧光分类
物质经过紫外线照射后发出荧光的现象,包括诱发荧光和自发荧光两种。
1、诱发荧光
荧光染料先对物体进行染色,再利用紫外线对染色了的物体进行照射使荧光发出,叫做诱发荧光。
2、自发荧光
利用紫外线照射叶绿素、血红素等使红色的荧光发出,叫做自发荧光。
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