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高速逆流色谱法的原理

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1982年,美国国立卫生院Ito博士研制开发了一种新型的、连续高效的液液分配色谱技术--高速逆流色谱法,这种技术不同于其它色谱技术,任何固态载体其均不需要,所以可以使固相载体表面与样品发生反应而造成的样品污染、失活、变性和不可逆吸附等不良影响得以避免,同时其具备较高的回收率,低廉的价格,较大的进样量,较为广泛的适用范围以及快速等优点。所以其广泛应用于生物、医药、食品、材料、化妆品和环保等领域,其在天然产物活性成分的分离纯化领域特别受到重视。


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原理

在对旋转管的流体动力平衡进行研究时,偶然发现了高速逆流色谱法,其为建立于单向性流体动力平衡体系之上的一种逆流色谱分离方法。当使用缓慢的速度转动螺旋管时,螺旋管中的两相由一端分布到另一端,将其中一相当作移动相,由一端往另一端洗脱时,在螺旋管里,另一相的保留值约为一半,然而随着移动相流速的增大,这一保留量会减小,从而降低了分离效率。然而加快螺旋管的转速,会改变两相的分布,当转速达到临界范围时,沿螺旋管长度两相就会完全分开,其中首端的一段会由某一相全部占据,这一段被叫做首端相,尾端的一段由另一段全部占据,这一段被叫做尾端相。两相的这种单向性分布特征正好为高速逆流色谱所利用。在高的螺旋管转动速下,若由首端相往尾相送入,其将穿过首端相往螺旋管的尾端移动。当分离时,首先将其中的一相(固定相)注入到螺旋管内,之后将移动相由合适的一端泵入,使其载着样品在螺旋管中无限次的分配。固定相随着仪器的转速越快,保留的越多,也就会有越好的分离效果,并且使分离速度得到大大地提高,所以叫做高速逆流色谱


2006-01-15 浏览次数:184次
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